Obtenção e caracterização de linhagem celular primária de osteossarcoma canino

Abstract

Primeiramente agradeço a Deus, que me deu força e serenidade para que conseguisse chegar até o final desta etapa. Aos meus pais, Mauro e Alvarina, que me ensinaram a humildade, a serenidade, a ser uma pessoa justa, e sempre trabalharam e investiram em meus estudos. Eu sei que é muito difícil pra vocês aceitar e suportar a distância, mas mesmo assim não deixam de me apoiar em todas as decisões. A família é a essência de tudo, sem vocês eu não teria chegado até aqui. AMO VOCÊS!!! Ao meu irmão Edney, que é um capítulo à parte da minha vida, com ele eu aprendi a respeitar as diferenças e a enfrentar as dificuldades, aprendi também o amor incondicional, na sua forma mais pura e simples. Agradeço também pelas orações, e pelo enorme carinho. À minha avó Purcina (in memorian) pelas orações, que me sempre me fortaleciam não deixando que eu desanimasse nem desistisse por mais que as dificuldades aparecessem. Ao meu namorado, Jeferson, pelas palavras de incentivo e pelo apoio nas horas mais difíceis. Por compreender a grandiosidade e importância deste trabalho e por entender a minha ausência e principalmente a falta de tempo. Ao meu orientador Prof. Dr. Durvanei, por ter me recebido em seu laboratório e me fazer sentir parte dele. Agradeço também pela paciência, ensinamentos, e pelas contribuições extremamente enriquecedoras, pelas risadas, e pelo apoio nos momentos difíceis. Gostaria de dizer que sinto muito orgulho de poder aprender um pouquinho com você, e de poder trabalhar com alguém tão competente, dedicado e que ama realmente o que faz. À minha orientadora, Prof. Dra. Maria Angélica Miglino, pelos ensinamentos e pelo apoio, por ter me recebido e me dado a oportunidade de iniciar a vida científica no departamento, pois, poucos são àqueles que nos dão oportunidade de começar, sem ao menos nos conhecer. À minha irmãzinha Loris e aos amigos Álvaro e Lázaro, pelo companheirismo, acolhimento, amizade sincera, pelos puxões de orelha, e principalmente, pelo incentivo e sábias palavras nas horas de dificuldade. À minha ""mãezinha postiça"", Norma, pela amizade, compreensão, companheirismo, carinho, preocupações, pelo cuidado e pela "ajudinha" nas horas de aperto. Às companheiras de laboratório, Fernanda, Myriam e Ana Rita, pela amizade e por toda ajuda, principalmente quando iniciei os experimentos e as atormentava o tempo todo com medo de fazer algo de errado. Ao meu amigo, André, que me ajudou muito desde o começo e principalmente durante as coletas inesperadas, sempre de bom humor, mesmo que fosse um calo ósseo "fora de hora". À minha amiga Drica, que me acolheu, me ajudou muito e ofereceu sua sincera amizade. À amiga Cristiane Wenceslau, pelas dicas e pela ajuda com os experimentos de diferenciação.

<b>Caracterização das células do epitélio coclear de fetos de cão</b>

“…Artigos recentes demonstraram recuperação dessas células ciliadas cultivadas in vitro a partir de células derivadas da cóclea de feto de camundongo (DOETZLHOFER et al, 2004;WHITE et al, 2006;OSHIMA et al, 2007;SAVARY et al, 2007;SHI;KIRWAN;LIVESEY, 2012 (DOETZLHOFER et al, 2004), e ou a associação entre ambas (tripsina mais colagenase) (WHITE et al, 2012). Sabe-se que a utilização de tripsina como método de digestão enzimática conduz a uma cultura de células epiteliais que quando digeridas com colegenase, formam cultura de células fibroblastóides (ALCANTARA, 2010;PAROLINI et al, 2014). Na sequência testou-se os meios de cultivos mais citados na literatura para cultivo de células de cães, sendo eles DMEM-HIGH glicose (VAGS et al, 2009), ALPHA-MEM (BERTOLO et al, 2015) e DMEM-F12 (VAGS et al, 2009 DOETZLHOFER et al, 2004;SAVARY et al, 2007;YERUKHIMOVICH et al, 2007;DIENSTHUBER;HELLER, 2009;WHITE et al, 2012;CHAO et al, 2013 (WENCESLAU, 2009;CHAO et al, 2013;FAVARON et al, 2014).…”