Ocorrência e caracterização de Escherichia coli produtora de toxina de Shiga na linha de abate de bovinos para exportação e em cortes refrigerados de bovinos e de aves comercializados na região da Grande São Paulo

Abstract

Aos meus pais, Márcia e Roberto, com muito amor, por todo apoio e incentivo, não só na realização deste trabalho, mas em vários momentos da minha vida. Aos meus pais, Roberto e Márcia, que sempre acreditaram em mim. Obrigada pelo amor, carinho, confiança e apoio que sempre me deram.Ao meu irmão Thiago "Cabeça", pela união, ajuda e amizade em todos momentos.Às minhas queridas avós Zelinda, pelo amor e velinhas acendidas e Mafalda, pelo amor e pelas bençãos.Ao meu namorado Luiz por todo amor, incentivo, paciência, dedicação e companherismo sempre que precisei.Às amigas-irmãs Bia, Carol e Jan pela amizade verdadeira, conselhos, ajuda e momentos inesquecíveis. Escherichia coli produtoras de toxina de Shiga (STEC) são patógenos veiculados por alimentos capazes de causar desde diarréia branda até severa e sanguinolenta e evoluir para complicações graves como colite hemorrágica, síndrome hemolítica urêmica e púrpura trombótica trombocitopênica. Esses microrganismos têm sido associados a numerosos surtos e vários casos esporádicos de infecções em todo o mundo devido ao consumo de alimentos contaminados. O sorogrupo O157 desse grupo de microrganismos é considerado o principal devido ao seu envolvimento em surtos de doença por STEC, entretanto, muitos casos vêm ocorrendo em todo o mundo devido a cepas patogênicas de STEC não-O157, como O26, O103, O111 e O145. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a ocorrência de STEC em três pontos da linha de abate de bovinos destinados à exportação e em cortes refrigerados de aves e de bovinos comercializados na região da Grande São Paulo; pesquisar a presença dos fatores de virulência dos isolados através dos genes stx 1 , stx 2 , eaeA e ehxA; identificar isolados de E. coli O157:H7 pela pesquisa dos genes uidA, rfb O157 e flic H7 ; verificar a citotoxicidade em células Vero; pesquisar a atividade enterohemolítica dos isolados; avaliar o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos; identificar os sorotipos e avaliar a diversidade genética dos isolados de STEC obtidos. Na linha de abate, 201 animais foram amostrados, obtendo-se 603 amostras que compreenderam 201 amostras provenientes do couro, 201 de carcaça e 201 de meia carcaça. No varejo, foram analisadas 100 amostras de cortes de carne bovina e 100 de cortes de frango. A metodologia utilizada para detecção de E. coli sorogrupo O157 foi a preconizada pela ISO 16654, enquanto para os sorogrupos O26, O103, O111 e O145 foi empregada a metodologia descrita pelo "Surveillance Group for Diseases and Infections of Animals" (NRM 006). Os isolados obtidos foram confirmados como STEC pela técnica de PCR. Dos 201 animais amostrados, dois (1,0%) foram positivos para STEC, obtendo-se sete isolados (três do animal número 399 e quatro do animal 401) do couro. Não houve o isolamento do microrganismo nas amostras de carcaça e meia carcaça. Os sete isolados apresentaram o perfil stx 2 , uidA, eaeA, ehxA, rfb O157 e fliC H7 podendo, assim, ser considerados E. coli enterohemorrágica (EHEC) pertencentes ao sorotipo O157:H7. Na avaliação da ativ...

Propriedades de adesão e citotoxicidade de isolados de Escherichia coli produtora da toxina de Shiga (STEC) de origem bovina

“…No Brasil, os estudos sobre STEC ainda são incipientes. Cepas produtoras de toxina de Shiga foram isoladas de rebanho bovino aparentemente saudável (CERQUEIRA et al, 1999;SALES et al, 2006), com alta prevalência e aparentemente há predomínio de STEC não-O157 (CERQUEIRA et al, 1999;PIGATTO, 2003;IRINO et al, 2005).…”

“…presente trabalho foi conduzido no Laboratório de Microbiologia Médica da Universidade CEUMA inicialmente com 56 amostras de Escherichia coli pertencentes à bacterioteca local que foram previamente isoladas de fezes bovinas de rebanho apto para o abate, coletadas no interior do Estado do Maranhão(SALES, 2006). As amostras foram mantidas a -20ºC em meio BHI (Brain Heart Infusion) com 20% de glicerol.…”

Escherichia coli produtora de toxina de Shiga em carne moída comercializada na cidade de São Paulo, SP

“…Classificação e origem das amostras de carne moída analisadas. (Gannon et al, 1997) e rfb O157 (Paton e Paton, 1998 No Brasil, apesar da ocorrência de STEC em alimentos ser extremamente baixa, há relatos da sua presença em carnes e produtos derivados (Cerqueira et al, 1997;Bergamini et al, 2007;Rodolpho e Marin, 2007;Alvares, 2011) e em amostras de carcaças (Rigobelo et al, 2008;von Laer, 2009) e de fezes de bovinos (Cerqueira et al, 1999;Rigobelo et al, 2006a, b;Aidar-Ugrinovich et al, 2007;von Laer, 2009 Na cidade do Rio de Janeiro, RJ, foram analisadas 105 amostras de carnes moídas, hambúrgueres, quibes e almôndegas e, dentre a detecção de alguns patotipos de E. coli diarreiogênicas não foi isolado o sorotipo de STEC O157:H7.…”

“…Uma possibilidade é a perda dos genes devido, por exemplo, à maneira como os isolados foram mantidos até o momento dos testes moleculares. Dessa forma, é interessante ressaltar que todos os isolados obtidos na presente pesquisa foram imediatamente submetidos a testes moleculares para a detecção dos genes de virulência e, posteriormente, diversas cópias de cada isolado foram mantidas congeladas à temperatura de -70°C em TSB adicionado de 20% de glicerol e reativadas a cada novo teste.Em trabalho conduzido em nosso laboratório, São Paulo, entre 2010 e 2011,Alvares (2011) não detectou STEC em 100 amostras de cortes bovinos e 100 amostras de cortes de frango adquiridas no varejo da Grande São Paulo. Como esse…”