Optimierung von Enzym‐Modul‐Systemen zur Synthese von Nukleotidzuckern mittels Multiplex‐Kapillarelektrophorese

Abstract

Die Kosten des Downstream-Processings verursachen einen Großteil der Herstellungskosten monoklonaler Antikörper (mAbs). Im Plattform-Downstream-Processing werden vor allem chromatographische Verfahren zur Aufreinigung der mAbs aus Zellüberstand eingesetzt. Eine Alternative ist die Extraktion der mAbs mit wässrigen Zweiphasen-Systemen (aqueous two-phase systems, ATPS). Wissenschaftliche Studien haben das Potenzial der wässrigen Zweiphasen-Extraktion (ATPE) mit verschiedenen ATPS belegt. Die Aufreinigung der mAbs in einer kontinuierlichen, mehrstufigen Extraktion, die zu einer hohen finalen Reinheit des mAbs führt, wurde bisher kaum untersucht. Speziell für kontinuierliche Fermentationsprozesse bietet die ATPE einen Vorteil gegenüber der diskontinuierlichen Chromatographie.Im Rahmen dieser Arbeit wird das Anwendungspotenzial der ATPE bei der Herstellung von mAbs diskutiert. Es werden zwei Möglichkeiten betrachtet, die ATPE in bestehende Plattformprozesse zu integrieren. Diese unterscheiden sich im Einsatz der ATPE, die entweder als Ersatz oder als Unterstützung der im Capture-Schritt herkömmlich genutzten Protein-A-Chromatographie infrage kommt. Beide Möglichkeiten werden anhand experimenteller Ergebnisse diskutiert.