Optimization of the conditions for the expression of an anti-transthyretin scFv in Pichia pastoris

Produção de fragmento recombinante de anticorpo em Pichia pastoris

“…( Clare et al, 1991;Tsujikawa et al, 1996;Werten et al, 1999;Woo et al, 2002;Li et al, 2003;Wu et al, 2003;Cha, Dalal e Bentley, 2005;Emberson et al, 2005;Ettayebi e Hardy, 2008;Hermanrud et al, 2011;Wang et al, 2011) 20 (Brankamp et al, 1995;Shi et al, 2003;Wang et al, 2005;Choi e Park, 2006;Hu et al, 2006;Rahbarizadeh et al, 2006;Zhang et al, 2006;Riedstra et al, 2007) 30 (Okabayashi et al, 1996;Ben Tanfous et al, 2006) Existem diversos fatores que podem influenciar a expressão de proteínas em P. pastoris, tal como o pH, temperatura, concentração de metanol, a densidade celular, a composição do meio e adição de compostos como sorbitol, EDTA e casaminoácidos (Pennell e Eldin, 1998;Jafari, Sundström e Holm, 2011;Goncalves et al, 2013).…”

“…A suplementação de meio de cultivo com casaminoácidos aumentou a produção de diferentes proteínas em P. pastoris (Werten et al, 1999;Li et al, 2003;Wang et al, 2005), especialmente na expressão de fragmentos scFv (Luo, Mah, et al, 1997;Woo et al, 2002;Li et al, 2003;Shi et al, 2003;Hu et al, 2006;Rahbarizadeh et al, 2006;Riedstra et al, 2007).…”