p53-Mutationsnachweis in Abstrichen der Mundschleimhaut von Patienten mit oralem Plattenepithelkarzinom

Abstract

Tumour-suppressor gene p53 encodes for an important cell-cycle regulatory protein and is therefore probably important for the development of many malignant diseases, e.g. squamous cell carcinoma of the mouth. This gene has mutated most frequently in connection with the development of cancer, so it has been well explored. Hence we chose it to find out whether swabs of the oral mucosa are suitable for supplying material for the detection of mutations in a gene that is connected with the development of oral squamous cell carcinomas, because swabs are easier to obtain than biopsies. We examined biopsies, swabs from the tumour, and swabs from mucosa that appeared healthy from 32 patients with oral squamous cell carcinoma and mucosal swabs from 35 healthy persons with polymerase chain reaction (PCR) and temperature gradient gel electrophoresis (TGGE). Fourteen of the 32 patients with a tumour showed mutations of p53, and in all cases the mutation could be demonstrated both in the biopsy and in the tumour swab. In four cases the mutation was also found in the swab of normal mucosa. Our investigations revealed that swabs are a suitable method for obtaining material for the detection of gene mutations in oral squamous cell carcinomas.

Nachweis von TP53-Mutationen mittels Exfoliativzytologie (brush biopsy) oraler Leukoplakien

“…Im vorliegenden Fall beruhte dies zunächst auf der Annahme, dass die in Abstrichpräparaten detektierten Mutationen auch tatsächlich den im Gewebe vorliegenden Veränderungen entsprachen. Dies konnte früher bereits bestä-tigt werden [5,6]. Keine der Proben wies einen so niedrigen DNA-Gehalt auf, dass eine Auswertung nicht möglich gewesen wäre.…”

“…Deshalb beschreiben die Begriffe "Abstrich" und "brush biopsy" den Vorgang der Probenentnahme zu diesem Zweck besser. Giese et al haben vor kurzem berichtet, dass jeweils identische TP53-Mutationen in 44% von 32 Mundhöhlenkarzinomen im Abstrich und im entsprechenden Bioptat nachweisbar waren [6].…”

“…Ein typisches Vierbandenmuster nach Silberfärbung wurde als Mutation gewertet, Kontaminationen über DNA-freie negative und archivierte positive Kontrollen ausgeschlossen. Die Vorgehensweise dieses Mutantenscreenings durch TGGE und die verwendeten Modifikationen sind in früheren Arbeiten detailliert beschrieben [6,14,23,26,27]. Soweit gängige statistische Vergleichsverfahren (c 2 -Test, Mann-Whitney-U-Test) benutzt wurden, erfolgte die Berechnung mit SPSS 10 und einem Signifikanzniveau von p <0,05.…”