Padronização de técnica manual para obtenção de plasma rico em plaquetas de bovino

Abstract

Resumo: Para padronização de uma técnica manual para a obtenção de plasma rico em plaquetas (PRP) autólogo em bovinos com custo reduzido (método manual) e de boa qualidade (capacidade de concentrar plaquetas, alta concentração de fatores de crescimento e contaminação reduzida com leucócitos e eritrócitos), que poderá ser utilizado como um agente modulador da resposta imune de vacas com diferentes enfermidades, 450 ml de sangue total de nove vacas clinicamente saudáveis e com perfil hematológico normal foi coletado em bolsas de sangue CPDA-1 e processado dentro de quatro horas após a coleta. O sangue foi separado em alíquotas para avaliar 8 protocolos (P) de centrifugação dupla que variaram quanto a velocidade e o tempo de centrifugação. A contagem de plaquetas, eritrócitos e leucócitos na suspensão obtida (PRP) foi realizada pelo método manual em câmara de Neubauer: P5 (400g e 800g ambos durante 10 min) foi o protocolo com maior número de plaquetas, seguido por P3 (120g e 473g ambos durante 10 min), P4 (300g e 640g durante 10 min cada), P6 (640g durante 10 min e 640g durante 5 min), P8 (640g durante 5 min e 120g durante 10 min) e P7 (720g e 720g durante 5 min) e diferentes (p<0,05) dos menores valores encontrados em P1 (120g e 240g, ambos por 5 minutos) e P2 (120g e 473g ambos por 5 min). Em relação aos eritrócitos, P8, P7, P6, P5 e P4 apresentaram menores concentrações e maiores valores (p<0,05) foram observados em P3 e P2. Menores quantidades de leucócitos foram observadas em P5, P6, P8 e P7 com o maior valor obtido em P2 (p<0,05). Todos os protocolos (P1 a P8) foram eficientes em concentrar plaquetas sendo o valor mais baixo (3,65±0,79) observado em P1. Em relação aos fatores de crescimento ao se mensurar TGF- 1, os protocolos P1 e P8 evidenciaram valores mais elevados. De acordo com os resultados obtidos os protocolos P5 e P8 apresentaram os melhores resultados para confecção de PRP bovino.

CCS e amiloide A do leite de quartos mamários tratados na secagem com plasma rico em plaquetas autólogo, associado ou não a antibiótico

“…O método manual para obtenção do PRP descrito por Marques et al (2014) foi eficiente para concentração de plaquetas com resultados bastante semelhantes aos obtidos pelos autores. A média de plaquetas no sangue foi de 290±40 x 1000/mL, enquanto no PRP a média foi de 2.477±500 x 1000/mL, o que representa um valor aproximadamente 10 vezes maior no PRP que no sangue (Tab.…”

“…O PRP foi obtido dos animais do T2 e do T3, conforme protocolo descrito por Marques et al (2014). Após antissepsia adequada da pele na região do pescoço, de cada animal foram coletados 450 mL de sangue em bolsa de transfusão contendo CPDA-1 (ácido cítrico, citrato de sódio, fosfato de sódio, dextrose e adenina), por punção venosa da jugular com cateter 16g acoplado à bolsa, sendo constantemente homogeneizado.…”

Caracterização e viabilidade da fração vascular estromal proveniente da bola adiposa de Bichat associada ao plasma pobre em plaquetas - uma opção para tratamentos estéticos

“…A obtenção do PPP usado no experimento seguiu a metodologia descrita por Marques et al (2014). Trinta e dois tubos tipo vacutainer contendo o anticoagulante citrato de sódio foram usados para a coleta de sangue por meio de venopunção periférica, os quais foram centrifugados a 200 × g por 5 minutos (Centrífuga EBA -200; Andreas Hettich GmbH & Co. KG, Tuttlingen, Alemanha).…”

“…Após análise estatística, a viabilidade celular em T0 foi significativamente menor quando comparada aos grupos TS24PPP, TS48PPP e CS24DMEM. Acredita-se que isso ocorreu devido ao fato das células do T0 não possuírem tempo de se adaptar ao meio imediatamente após seu processamento, além do estresse sofrido devido à recém digestão enzimática com a colagenase tipo 1 (Marques et al, 2014) Letras minúsculas diferentes expressam diferença significativa entre os grupos (p < 0,05). Fonte: Autores.…”

“…Assim, o objetivo do presente trabalho foi verificar a viabilidade das células que compõem a FVE obtida a partir da paCAB em um meio de manutenção visando sua aplicação clínica, o PPP, por até 48 h. O presente trabalho, de natureza qualitativa, foi realizado baseado em metodologias previamente descritas, como a obtenção do PPP (Marques et al, 2014), a obtenção da FVE (Zuk et al, 2001;Dongen et al, 2016), o acondicionamento em seringas (Almeida et al, 2008;Andia et al, 2019;Asri et al, 2005), as análises de citometria de fluxo e devidas imunomarcações (Meirelles et al, 2006;Dominici et al, 2006), proliferação de células aderentes (Yang et al, 2008), e o ensaio de avaliação da diferenciação celular ou potencial multipotente (Dominici et al, 2006;De Souza et al, 2018).…”