PCR Assay for Detection of the Phytoplasma Associated with Maize Bushy Stunt Disease

Incidência de viroses e enfezamentos e estimativa de perdas causadas por molicutes em milho no Paraná

“…Seis amostras de plantas com sintomas que se caracterizam por nanismo acentuado, folhas estreitas, enrijecidas, com deformações, e presença de grãos na inflorescência, quando submetidas à PCR para detecção de fitoplasma, utilizando-se oligonucleotídeos específicos para detecção de "Maize bushy stunt phytoplasma" (Harrison et al, 1996), apresentaram resultado negativo. Porém, quando estas mesmas amostras foram submetidas a PCR para detecção de fitoplasma, utilizando-se os primers universais R16F2 e R16R0 (Lee et al, 1993), duas amostras apresentaram resultado positivo.…”

“…Na detecção de fitoplasma e espiroplasma, o DNA total usado para amplificação por PCR foi extraído segundo Prince et al (1993), e foram utilizadas as seguintes condições de reação e oligonucleotídeos para detecção de "Maize bushy stunt phytoplasma": MBS-F1 5' AATGTCGAACTAACAGGCGG 3', e MBS-R1 5' GGTTTTGGTTTAGGGGTT 3', conforme Harrison et al (1996). Nas seis amostras com sintomas atípicos de MBSP, a detecção de fitoplasma foi testada também utilizando-se condições de reação e os oligonucleotídeos R16F2 5' ACGACTGCTGCTAAGACTGG 3'e R16R0 5' TGA CGGGCGGTGTGTACAAACCCCG 3', descritos por Lee et al (1993).…”

Polymerase Chain Reaction for Phytoplasmas Detection

“…These differences can be compared and used as a diagnostic test for a particular phytoplasma. Phytoplasma diagnostics has been routinely based on phytoplasma-specific universal (generic) ( Table 1) or phytoplasma group specific (Table 2) Polymerase Chain Reaction (PCR) primers designed on the basis of the highly conserved 16S ribosomal RNA (rRNA) gene sequences (1, 38,44,61,77,144,153). Nevertheless, to detect phytoplasmas in DNA samples universal phytoplasma primers designed on sequences of the 16S-23S rRNA spacer region (SR) (153) are generally using.…”

Identificação molecular de isolados do fitoplasma do enfezamento vermelho do milho coletados no Estado de São Paulo.

“…Atualmente os fitoplasmas estão inseridos na classe Mollicutes e estudos de homologia de DNA em genes altamente conservados, q ue codificam RNA, DNA e proteínas ribossômicos, têm mostrado que os fitoplasmas compreendem um grupo distinto de todos os outros procariotos (Harrison et al, 1996).…”

“…Vários grupos de fitoplasmas têm sido diferenciados com base na variação de sequências de nucleotídeos do gene 16S ribossômico. A classificação é baseada primariamente no tamanho do genoma e na filogenia deduzida da seqüência de nucleotídeos do gene 16SrRNA (Harrison et al, 1996).…”