Peptídeos de conformação restrita relacionados ao sítio 2 do fator de crescimento de fibroblastos ácido humano (hFGF-1): estudo sobre estrutura e atividade

Abstract

AGRADECIMENTO A DEUS AGRADECIMENTO A DEUSFostes Vós que me formastes as entranhas, e no seio de minha mãe Vós me tecestes.Eu vos louvo e vos dou graças, ó Senhor, porque de modo admirável me formastes! Que prodígio e maravilha as vossas obras! Até o mais íntimo, Senhor, me conheceis; uma sequer de minhas fibras ignoráveis, quando eu era modelado ocultamente, era formado nas entranhas subterrâneas. Ainda informe, os vossos olhos me olharam, e por Vós foram previstos os meus dias; em vosso livro estavam todos anotados, antes mesmo que um só deles existisse. (Sl.138,(13)(14)(15)(16) foram o meu porto-seguro de carinho, apoio, estímulo e ajuda nos momentos mais difíceis.A todos todos aqueles que, direta ou indiretamente, contribuíram para a concretização deste trabalho. Este trabalho foi realizado graças aos auxílios financeiros das seguintes Instituições:viii Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), através da bolsa de Doutoramento concedida à autora durante a maior parte do Curso.Pró-Reitoria de Pós-Graduação da Universidade de São Paulo, através dos auxílios financeiros concedidos à autora na forma de passagens aéreas para a realização de um estágio na Itália (novembro/98) e apresentação de um poster em Minneapolis, Minnesota, USA (junho/99).Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo, através da verba concedida ao projeto de pesquisa coordenado pela Dra. Miranda. LISTA DE ABREVIAÇÕES As abreviações utilizadas estão de acordo com as recomendações da IUPAC-IUBComission on Biochemical Nomenclature (J. Biol.Chem. 264, 668-673, 1989).A ou Ala -alanina ACN -acetonitrila BrDU -5-bromo 2 ' -deoxiuridina BSA -albumina sérica bovina (bovine serum albumin) SPPS -solid phase peptide synthesisT ou Thr -treonina tBoc -tert butiloxicarbonilaTimidina triciada -metil-3 H-timidina (Kiyota et al., 1996.Diante desta constatação e com base em dados descritos na literatura (Harper & Lobb 1988;Burgess et al., 1991;Pantoliano et al., 1994Thompson et al., 1994;Imamura et al., 1995;Blaber et al., 1996;Ornitz et al., 1996;Zhu et al.,1991Zhu et al., , 1995Zhu et al., , 1997 Schwizer, 1995;Sieber & Moe, 1996;Rizo et al., 1996); desenhamos dezessete peptídeos relacionados ao Sítio 2 (97-132) do hFGF-1 mostrados na Tabela 1 abaixo: Sítio 2 hFGF-1 F V G L A K N G S S K R G P R T -NH2 (X) = Dbu; ( -) = deleção de aminoácidos; (c) = ciclo; numeração da seqüência segundo Jaye et al., 1986Todos os peptídeos foram sintetizados manualmente por síntese em fase sólida, sempre que possível purificados à homogeneidade por RP-HPLC e caracterizados quimicamente por RP-HPLC, análise de aminoácidos e espectrometria de massas. Os peptídeos cíclicos foram obtidos por: a) oxidação das sulfidrilas das cisteínas e formação de ponte dissulfeto intramolecular; b) reação entre os grupos amina e carboxila de cadeias laterais de dois diferentes resíduos de aminoácidos com formação de uma ligação lactama.Os testes de atividade mitogênica foram realizados sempre que os peptídeos eram obtidos com pureza ≥90% determinad...

Peptídeos mitogênicos ou inibidores da atividade do fator de crescimento de Fibroblastos-I humano baseados no complexo FGF/receptor/heparina

“…Resultados descritos anteriormente (Oyama Jr., S., 1995;Oyama et ai., 1996;Kiyota et ai., 1999;Kiyota, S., 2000) indicaram ser possível obter compostos de ação efetora ou inibitória sobre a atividade mitogênica dos FGFs através do desenho racional de estruturas peptídicas derivadas destas proteínas e de seus receptores.…”