Perfil de Metilación de Genes Supresores de Tumores APAF1, ASSP1, p73 y FHIT en Pacientes con Leucemia Linfoblástica Aguda Infantil

Abstract

RESUMEN:La leucemia linfoblástica aguda (LLA), es la neoplasia mas frecuente en la población infantil. Se manifiesta por una perdida de diferenciación de progenitores linfoides produciendo un aumento de células inmaduras. La hipermetilación en la región promotora de genes supresores de tumores (GST) puede producir un silenciamiento génico que le proporciona a la célula leucémica una ventaja proliferativa o la previene de la apoptosis. Se estudia el estado de hipermetilación de 4 GST involucrados en la apoptosis: APAF1, ASPP1, p73 y FHIT y su asociación con la sobrevida de pacientes menores de 15 años con diagnóstico de LLA. Se analizaron 38 muestras de médula ósea mediante modificación con bisulfito del ADN y reacción en cadena de la polimerasa especifica de metilación (MSP). El rango de edad al diagnóstico fue de 10 meses a 13,8 años. La sobrevida global fue de 69% a los 5 años. El 81,5% de los pacientes tuvo al menos un gen hipermetilado. La frecuencia de metilación observada fue: APAF1 68,4%, FHIT 56,4%, p73 42% y ASPP1 18,4%. La asociación entre hipermetilación y grupo <5 años y ≥5 años fue: Global p=0,20, APAF1 p=0,03, FHIT p=0,51, p73 p=0,51 y ASPP1 p=0.67. Las curvas de sobrevida se calcularon según frecuencia de hipermetilación de cada gen: APAF1 p=0,05, FHIT p=0,31, p73 p=0,98 y ASPP1 p=0,82. La alta frecuencia de hipermetilación obtenida reafirma la participación de la metilación en la región promotora de GST en la patogénesis de la LLA. La hipermetilación del gen APAF1 fue muy frecuente y se asoció significativamente a la sobrevida del grupo de estudio, mostrando a este gen como un factor predictivo de mal pronostico en pacientes con LLA.PALABRAS CLAVE: Hipermetilación; Leucemia linfoblástica aguda Infantil; Genes supresores de tumores; Genes blanco de p53; Apoptosis; Sobrevida. INTRODUCCIÓNEn Chile existe poca información sobre estudios moleculares en Leucemias (Artigas et al., 2002, 2006Reyes et al., 2011). Esta neoplasia es la más frecuente en niños menores de 15 años, correspondiendo al 35-40% del total de cánceres en la población infantil. La leucemia linfoblástica aguda (LLA) es el tipo de Leucemia mas frecuente con un 80% de los casos. Se ha descrito una incidencia anual de 2,5 a 3 casos por cada 100.000 niños menores a 15 años lo que equivale entre 100 y 110 nuevos casos cada año (Guía Clínica Leucemia menores de 15 años Minsal el 2010). La LLA, es un trastorno maligno que se origina en una célula hematopoyética única progenitora de linfocitos B o T y se caracteriza por una pérdida de diferenciación de progenitores linfoides produciendo un aumento en células linfoblásticas inmaduras (Pui et al., 2008). La hipótesis mas aceptada es que interactúan en la leucemogénesis múltiples factores, genéticos, epigenéticos y ambientales. La hipermetilación de sitios CpG en la región promotora de genes supresores de tumores (GST) es un evento epigenético adquirido, frecuente en la LLA y contribuiría en el proceso