A Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria oportunista, considerada um dos principais agentes de infecção nosocomial em hospitais associada múltipla resistência a antimicrobianos. Em animais, principalmente cães, a otite é uma enfermidade de grande incidência associado a P. aeruginosa. A ocorrência de isolados multirresistentes a metalo beta lactamase com presença de genes blaIMP-1, blaVIM-2, blaSPM-1 e blaNDM-1 tem sido bem descrita em isolados humanos entretanto a ocorrência em animais são escassos. O objetivo deste trabalho foi a detecção dos genes de metalo-beta-lactamses em isolados de P. aeruginosa de otite em caninos por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Isolados compatíveis com P. aeroginosa (n=50) foram caracterizados e analisados por sequenciamento do 16S rDNA, sendo 44 confirmado como P. aeruginosa. Entre os isolados, 4,54% (2/44) apresentaram resultado positivo para blaNDM-1 e em nenhuma das amostras foram detectados os genes blaIMP-1, blaVIM-2 e blaSPM-1. Neste estudo observou-se o primeiro relato de P. aeruginosa com o gene blaNDM-1 em animais no Brasil. A detecção do presente gene de resistência, e a possibilidade já relatada de transmissão, torna cada vez mais importante as pesquisas moleculares para detecção dos genes de resistência MBL em P. aeruginosa em pets devida estreita convivência com humanos.