Genipa americana L., popularmente conhecido como jenipapeiro, é uma Rubiaceae, nativa do Brasil, de ocorrência nas regiões tropicais e subtropicais do país e de grande importância econômica. Objetivou-se com este trabalho analisar a qualidade fisiológica de sementes de jenipapo com diferentes teores de água e substratos. A secagem foi realizada sob temperatura de 25±2 ºC. Foram utilizadas sementes com teores de água de: 50,5; 25,2 e 12,2% e os substratos: rolo de papel, sobre papel, sobre areia, fibra de coco e comercial. As variáveis analisadas foram: teor de água, germinação e vigor pelo índice de velocidade de germinação, tempo médio de germinação, porcentagem de plântulas normais, comprimento da parte aérea e raiz e massa seca de plântulas. Sementes com teor de água de 50,5% germinaram 84% e apresentaram maiores médias das variáveis de vigor, enquanto com a redução do teor de água houve redução na germinação e no vigor, tendo as sementes com 12,2% de umidade apresentado germinação de 49%. Os substratos rolo de papel, fibra de coco e substrato comercial são os mais recomendados para germinação e crescimento de plântula de jenipapo.