Producción y caracterización de un anticuerpo monoclonal que reconoce el fragmento 28-30 kDa de la proteína MSP-1 de Plasmodium falciparum

Abstract

Los merozoitos del parásito Plasmodium falciparum contienen en su superficie los fragmentos producidos por el primer procesamiento proteolítico de la proteina MSP-1 (rnerozoite surface protein-1). Dichos fragmentos tienen pesos moleculares relativos aproximados de 83, 42. 38 y 28-30 kDa, respectivamente. En este estudio se describe la producción y caracterización de un anticuerpo monoclonal, denominado 8F4, que reconoce la proteina MSP-1 dadas las siguientes características del antigeno: 1) localización subcelular, 2) peso molecular relativo. 3) periodo de expresión durante el ciclo eritrocitico, 4) tipo de asociación con la membrana plasmática del parásito y 5) presencia de epítopes compartidos con MSP-1. Adicionalmente. se estableció que 8F4 reconoce el fragmento de 28-30 kDa, producto del primer procesamiento proteolitico de MSP-1. Los análisis realizados permiten confirmar que MSP-I , ,, , no permanece en la superficie del merozoito desoués de ocurrida la invasión. lo cual suoiere oue hace oarte del comoleio de . . polipéptidos que es liberado por el merozoito previamenie al eiento de ¡a invasibn. 8F4 es el primer anticuerpo monoclonal reportado hasta el momento que reconoce especificamente este fragmento.Palabras clave: malaria, Plasmodium falciparum. MSP-1. anticuerpo monoclonal Production and characterization of a monoclonal antibody that recognizes the fragment of 28-30 kDa of the protein MSP-1 from Plasmodium falciparum Merozoites of the malaria parasite Plasmodium falciparum have on their surface proteolytic processed fragments of MSP-1 (merozoite surface protein-1). These fragments have relative molecularweights of approximately 83. 42, 38, 28-30 kDa, respectively In this study we describe the characterization of a monoclonal antibody. denominated 8F4, that recognizes MSP-1 based upon the following characteristics: 1) subcellular location of the antigen. 2) relative molecular weight, 3) time of expression during the asexual life cycle of the parasite, 4) the association of the protein with the plasma membrane and 5) epitopes shared with MSP-1. In addition, it was found that 8F4 recognizes the 28-30 kDa fragment that arises as a consequence of the first proteolyiic processing of MSP-1. The study confirms that such fragment is excluded from the merozoite surface during invasion, suggesting that it makes part of a complex of polypeptides which is released from the merozoite before the invasion process takes place. This is the first report of a monoclonal antibody which specifically recognizes this polypeptide.Key Words: malaria, Plasmodium falciparurn, MSP-l. monoclonal antibody.Hace siglos, la malaria fue reconocida como una q u e afectan al género humano y pese a la de lasenfermedades parasitarias más importantes introducción de programas de control en muchas partes del mundo durante las décadas pasadas,