Production of guaianolides in Agrobacterium rhizogenes - transformed chicory regenerants flowering in vitro

In vitro production of chlorogenic acid in culture of transformed Cichorium intybus L.: Plants

“…Koren cikorije sadrži i do 40% inulina, polimera fruktoze, koji se koristi kao zaslađivač i prebiotik [2]. U znatno manjoj količini detektovani su eskulin, flavonoidi i vitamini [3], kao i seskviterpenski laktoni (gvajanolidi, eudezmanolidi i germakranolidi), veoma važna grupa fiziološki aktivnih jedinjenja [4,5]. Od fenolnih jedinjenja u ekstraktima cikorije najzastupljenija je cihorinska kiselina [6].…”

“…Ranija istraživanja su ukazala da kulture transformisanih korenova cikorije poseduju ogroman potencijal u proizvodnji farmaceutski važnih metabolita. Kulture transformisanih korenova C. intybus sintetišu eskulin i eskuletin [15], biološki aktivne seskviterpenske laktone [5,16], kao i hidroksicimetne kiseline [16] i neka isparljiva jedinjenja [17]. Međutim, o sadržaju sekundarnih metabolita u transformisanim regenerantima cikorije ali i drugih vrsta, generalno jako se malo zna.…”

“…Međutim, o sadržaju sekundarnih metabolita u transformisanim regenerantima cikorije ali i drugih vrsta, generalno jako se malo zna. Mi smo u ranijim eksperimentima pratili sadržaj gvajanolida u transformisanim regenerantima cikorije i utvrdili zavisnost količine posmatrane grupe seskviterpenskih laktona od fenofaze u kojoj se biljka nalazi [5]. Prema našem saznanju to je i jedino istraživanje produkcije sekundarnih metabolita u transformisanim regenerantima C. intybus.…”

“…Uspostavljanje kulture klijanaca, uslovi in vitro gajenja biljaka, transformaciju pomoću Agrobacterium rhizogenes A4M70GUS, kao i regeneraciju biljaka u kulturi transformisanih korenova smo opisali u prethodnom radu [5]. Transformisani korenovi, kao i kontrolni netransformisani korenovi rasli su na MS medijum bez hormona u prisustvu 6 g l -1 agara i 30 g l -1 saharoze.…”

“…Uzorci su sonifikovani 10 min a zatim centrifugirni na sobnoj temperaturi 5 min na 21000 g. Ekstrakcija je ponovljena dva puta, supernatanti su spojeni, razblaženi dejonizovanom vodom u odnosu 1:1 i profiltrirani kroz filtere Minisart® RC15 (#17761R, Sartorius, Goettingen,Nemačka). Sadržaj hlorogene kiseline je analiziran ranije opisanom UPLC-MS/MS metodom [5]. Analize su urađene na Waters Xevo tandem masenom spektrometru (Waters, Milford, Massachusetts, SAD), opremljenim elektrosprej jonizacionim izvorom, i vezanim za Acquity UPLC (Waters) tečni hromatograf.…”