Production of Well-Characterized Virus-like Particles in an Escherichia coli-Based Expression Platform for Preclinical Vaccine Assessments

Wahome, Newton; Cooper, Anne; Thapa, Prem; Choudhari, Shyamal P.; Gao, Fei; Volkin, David B.; Middaugh, C. Russell

doi:10.1007/978-1-4939-3389-1_29

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“… Transmission electron microscopy images of (A) LS (With kind permission from Springer Science and Business Media) and (B) LS_PB10_78…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 99%

“…The plasmid producing LS (pTBSG) was transformed into E. coli strain BL21 (λDE3) competent cells for protein expression. pTBSG plasmid and BL21(λDE3) were described previously . The PB10 epitope was fused to the C terminus of LS with a linker.…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

“…Many classes of scaffold nanoparticle systems have been examined for use in polyvalent antigen display including synthetic polymers, self‐assembled proteins, inorganic particles, and various others . Self‐assembling proteins are one of the more attractive scaffold systems because they offer precise size control, ease of production using recombinant DNA technology, and biocompatibility . The aim of this work is to evaluate the potential of a self‐assembling protein, lumazine synthase (LS), as a scaffold system for polyvalent antigen display.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

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Evaluation of lumazine synthase from Bacillus anthracis as a presentation platform for polyvalent antigen display

et al. 2017

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Polyvalent antigen display is an effective strategy to enhance the immunogenicity of subunit vaccines by clustering them in an array-like manner on a scaffold system. This strategy results in a higher local density of antigens, increased high avidity interactions with B cells and other antigen presenting cells, and therefore a more effective presentation of vaccine antigens. In this study, we used lumazine synthase (LS), an icosahedral symmetry capsid derived from Bacillus anthracis, as a scaffold to present 60 copies of a linear B cell epitope (PB10) from the ricin toxin fused to the C terminus of LS via four different linkers. We then investigated the effects of linker length, linker rigidity and formaldehyde crosslinking on the protein assembly, conformational integrity, thermal stability, in vitro antibody binding, and immunogenicity in mice. Fusion of the PB10 peptide onto LS, with varying linker lengths, did not affect protein assembly, thermal stability or exposure of the epitope, but had a minor impact on protein conformation. Formaldehyde crosslinking considerably improved protein thermal stability with only minor impact on protein conformation. All LS_PB10 constructs, when administered to mice by injection without adjuvant, elicited measurable anti-ricin serum IgG titers, although the titers were not sufficient to confer protection against a 10× lethal dose ricin challenge. This work sheds light on the biophysical properties, immunogenicity and potential feasibility of LS from B. anthracis as a scaffold system for polyvalent antigen display.

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“… Transmission electron microscopy images of (A) LS (With kind permission from Springer Science and Business Media) and (B) LS_PB10_78…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 99%

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

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Evaluation of lumazine synthase from Bacillus anthracis as a presentation platform for polyvalent antigen display

et al. 2017

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“…Vírus como: Influenza, RSV ("Respiratory syncytial virus"), HIV, HCV ("Hepatitis C virus"), entre outros; já foram e estão sendo produzidos utilizando células de inseto e o sistema baculovírus de expressão. Porém, outras estratégias podem ser utilizadas para a expressão de VLPs, como células de mamífero, plantas, bactérias e leveduras (Fontana et al, 2016;Naskalska & Pyrc, 2015;van Zyl & Hitzeroth;Wahome et al, 2016), contudo, deve-se levar em consideração a diferença nos custos de produção relacionados aos diferentes métodos.…”

Section: Discussionunclassified

Uso de baculovírus como ferrramenta para produção de antígenos vacinais e “virus like particles” (VLPs)

Chaves¹

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Inicialmente eu não poderia deixar de agradecer a Deus por essa oportunidade incrível que é viver. Sob sua luz continuo trilhando meu caminho, algumas vezes com derrotas, mas as vitórias (como essa) me lembram da sua profunda compaixão. Obrigada! Agradeço a minha mãe Graça, essa vitória também é sua, te amo profundamente! Agradeço também a minha irmã Larissa, obrigada por me ensinar a seguir em frente apesar das dificuldades da vida, te amo! Enfim, meu amor Marcus. Não existem palavras para expressar minha eterna gratidão.Você foi minha fortaleza, minha companhia e minha força de vontade. Dividimos muito mais que um teto, dividimos história de vida e muita cumplicidade. Amo-te!!! Aos meus queridos sobrinhos Thaís, Clara, Davi, Liz e Isadora, que despertam o melhor em mim e me dão força para continuar. Ao professor Bergmann, que eu tive a sorte e o privilégio de ser aluna. Obrigada por acreditar em mim e manter todas as portas abertas. Minha gratidão profunda ao Sr. Ao professor e meu orientador no período sanduíche Dr. Gary Blissard. Com ele aprendi bondade, profissionalismo e amor a ciência. O Gary é um cientista inspirador. Essa experiência em seu laboratório mudou tudo. Obrigada! Agradeço ao professor Tatsuya e Renato por sempre serem solícitos quando requisitados. À professora Anamélia Bocca, por sua colaboração e sugestões. Meu obrigada também aos seus alunos Márcio e Isaque. À Dra. Maria Elita por ter iniciado minha paixão por ciência. Aproveitando, agradeço a todas as pessoas da época de Embrapa (Iniciação científica) que foram sempre tão amáveis comigo: Marlinda, Zildinha, William querido, Raimundinha, Briana, Juliana e Saluana (amigas lindas). Agradeço a todo mundo, sem exceções, do laboratório de Baculovírus da UnB. Local onde fiz o meu mestrado e agora doutorado. Todos esses anos foram fundamentais para o meu crescimento emocional, profissional e pessoal. Porém, algumas pessoas tornaram meus dias mais alegres dentro do laboratório, principalmente no último ano do meu doutorado, são elas: Mariana Senna, Mayarha, Deborah e Laís. Obrigada por acreditarem em mim e serem amigas maravilhosas. iv Às amigas que conheci neste mesmo laboratório e agora são profissionais de sucesso: Anabele e Carol. Obrigada! Aos amigos dos laboratórios de Virologia (Holanda e Japão). Que muitas vezes me ouviram e ajudaram nos trabalhos. Desejo sucesso galera! Aos amigos do laboratório de Microscopia eletrônica agradeço a ajuda, carinho e torcida. Aos amigos Jeff, Rita e Lisa do laboratório Blissard, que me ajudaram em tudo e fizeram com que eu me sentisse em casa, mesmo estando em outro país. Galerinha do Maple Hill, obrigada por serem minha família americana. Aqui cito: Marislaine (Maris amiga querida), Larissa, Carlos (José), Camila, Vivi e Milena. Nossas histórias estão guardadas no coração. Agradeço a todos os amigos de Ithaca, obrigada por todos os momentos. Para Patrícia e Rogério um agradecimento especial. Aos meus amigos de uma vida inteira (Trupe). Alguns conheço muito antes de pensar em seguir essa carreira. Desculpem ...

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Viral Nanoparticles‐Mediated Delivery of Therapeutic Cargo

Zanganeh

Doroudian

Nowzari

et al. 2023

Advanced Therapeutics

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The rapid advancement of nanotechnology in recent years has opened new avenues of investigation for biomedical sciences. Viral nanoparticles (VNPs) are formulated from plant viruses, mammalian viruses, or bacteriophages. Based on their structure, viruses, and synthetic carriers have been utilized to design bio‐inspired nanocarriers, which serve as building blocks for innovative therapeutic applications. Scientists can chemically or genetically engineer VNPs to encompass various properties, such as enhancing their functionalization with therapeutic molecules and imaging reagents, enabling targeted delivery to specific ligands. The implementation of these novel nanocarrier platforms can revolutionize treatments for cancer, infectious diseases, and chronic illnesses. The primary goal of drug delivery systems is to localize cargo to the specific target site, increasing therapeutic benefits and minimizing off‐target effects. This review critically evaluates the major virus species used as nanocarriers, their applications in therapeutics, and their advantages and disadvantages.

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Production of Well-Characterized Virus-like Particles in an Escherichia coli-Based Expression Platform for Preclinical Vaccine Assessments

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Evaluation of lumazine synthase from Bacillus anthracis as a presentation platform for polyvalent antigen display

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Uso de baculovírus como ferrramenta para produção de antígenos vacinais e “virus like particles” (VLPs)

Viral Nanoparticles‐Mediated Delivery of Therapeutic Cargo

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