Propagación in vitro de Psidium guajaba mediante organogénesis directa a partir de segmentos nodales

Abstract

<p>Se indujeron múltiples brotes mediante organogénesis directa a partir de segmentos nodales de 10 genotipos diferentes de guayaba. Para ello se estableció un sistema de propagación clonal <em>in vitro </em>combinado con inducción rápida de brotes <em>ex vitro </em>para propagar árboles élite. La utilización de segmentos nodales permitió obtener en poco tiempo brotes adventicios adecuados para multiplicación masiva. La respuesta <em>in vitro </em>de los genotipos fue evaluada usando los medios de cultivo MS (Murashige y Skoog, 1962), Mc (Mascarenhas) y WPM (<em>Woody Plant Medium</em>) suplementados con 0,1 mg•L-1 de ácido indolácetico (AIA) y 0,25 mg•L<sup>-1</sup> de bencilaminopurina (BAP). El procedimiento de desinfección con hipoclorito de sodio previno eficientemente la contaminación de los explantes después de la inoculación en el medio de cultivo. El mayor porcentaje en la inducción de brotes se logró con 0,25 mg•L<sup>-1</sup> de BAP. Los segmentos nodales presentaron de 1 a 2 brotes adventicios por explante después de 15 días de inoculados y de 3 a 7 brotes a los 30 días después del inicio del cultivo. Una vez individualizados los brotes se usaron en una nueva fase de multiplicación masiva en la que se probaron cuatro sustratos diferentes durante el enraizamiento y el endurecimiento. Esta metodología permitió la propagación <em>in vitro </em>de guayaba cuatro semanas después del inicio del cultivo. Los mejores resultados se lograron con el medio WPM que permitió obtener las primeras plántulas enraizadas dos semanas después de la transferencia al sustrato de enraizamiento.</p><p> </p><p><strong>In vitro propagation of Psidium guajaba using direct organogenesis from nodal segments</strong></p><p>Multiple shoots were induced using direct organogenesis from nodal segments of 10 different genotypes of guayaba. For this an in vitro clonal propagation system combined with rapid ex vitro induction of shoots was established in order to propagate elite trees. The use of nodal segments resulted in adventitious shoots adequate for mass multiplication in less time. The in vitro response of the genotypes was evaluated using the culture media MS (Murashige and Skoog, 1962), Mc (Mascarenhas) and WPM (Woody Plant Medium) supplemented with 0.1 mg·L-1 of indole acetic acid (IAA) and 0.25 mg·L-1 of benzoaminopurine (BAP). The procedure for sterilizing with sodium hypochlorite effectively prevented the contamination of the explants after the inoculation of the culture medium. The greatest percentage of shoot induction was achieved with 0.25 mg·L-1 of BAP. The nodal segments showed between 1-2 adventitious shoots per explant 15 days post-inoculation and 3-7 shoots 30 days post-inoculation. Once individualized, the shoots were used in a new mass multiplication phase in which four different substrates were tested during rooting and hardening. This methodology permitted the in vitro propagation of guayaba four weeks post-inoculation. The best results were achieved with the WPM medium that resulted in the first rooted plantlets two weeks after the transfer to the rooting substrate.</p>

PROPAGACIÓN in vitro DE SELECCIONES DE GUAYABO (Psidium guajava L.)

“…Las diferencias mostradas fueron atribuidas al genotipo y no al tipo de explante, por lo que se pueden utilizar tanto ápices y nudos para el establecimiento de los cultivos in vitro. El uso del hipoclorito de calcio como desinfectante para estos genotipos sustituye al bicloruro de mercurio que es el desinfectante mayormente utilizado para guayabo (Concepción et al, 2005;Mishra et al, 2007a;Ocampo y Núñez, 2007), los procesos de oxidación son causados principalmente por el efecto abrasivo del agente desinfectante (Abdelwahd et al, 2008;Van Staden et al, 2006).…”

“…Allahabab Safeda no se logró inducir enraizamiento en ausencia de auxinas. El desarrollo de raíces en ausencia de reguladores de crecimiento puede ser debido a la síntesis de auxinas endógenas en cantidades necesarias para su desarrollo; estas concentraciones de auxina varían de acuerdo con el genotipo (Ali et al, 2003;Ocampo y Núñez, 2007).…”