Purification and Biochemical Characterization of Phytase Enzyme from Lactobacillus brevis Isolated from Fresh Kashar Cheese

Abstract

Son 20 yılda fitaz enzimi çevre koruma, beslenme ve biyoteknoloji alanlarında bilim insanlarının dikkatini çekmiştir. Fosfataz enzim grubunda yer alan miyo-inositol heksafosfat fosfohidrolaz (fitaz), fitatın daha az fosforile edilmiş inorganik fosfatlara ve fitata hidrolizini katalizler. Mikrobiyal kaynaklı fitazlar biyoteknolojik uygulamalarda (kâğıt endüstrisinde, yem sanayinde, gıda endüstrisinde ve toprak iyileştirmede) yaygın bir şekilde kullanılmaktadır.
 Mevcut çalışmada, taze kaşar peynirinden izole edilen Lactobacillus brevis NM-34 suşundan fitaz enzimi kısmi olarak saflaştırıldı ve enzimin optimum aktivite gösterdiği pH ve sıcaklık değerleri belirlendi. L. brevis NM-34’ün amonyum sülfat çöktürmesi sonucunda 243.80 U/mL’lik bir fitaz aktivitesi gösterdiği belirlendi. En yüksek fitaz aktivitesi görülen amonyum sülfat aralığında (%40-60) protein konsantrasyonu 0.989 mg/mL olarak ölçüldü. Fitaz enziminin Km ve Vmax değerleri sırasıyla 0.0146 mM ve 1.6 µmol/min olarak belirlendi. Kısmi olarak saflaştırılan fitazın optimum aktivite gösterdiği pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla pH 5 ve 50 °C olarak bulunmuştur. Araştırmamızdan elde edilen bulgulara dayanarak, bu bakteriden saflaştırılan enzimin endüstriyel uygulamalarda kullanılmasını uygun kılan kendine özgü niteliklere sahip olduğu tespit edilmiştir.