Rapid differentiation of Streptomyces from Nocardia by liquid chromatography

Abstract

A liquid chromatographic method is described for analysis of aerobic actinomycetes for isomers of diaminopimelic acid. One or two colonies of organism were hydrolyzed with 6.0 mol of HCI per liter at 121°C for 15 min. The hydrolysate was neutralized and buffered with an NaOH solution (3 mol/liter) containing 0.15 mol of sodium borate per liter. Precolumn derivatization with dansyl chloride was used to forn a fluorescent product for detection. Analysis was performed by reversed-phase, ion-pair chromatography. The L-diaminopimelic acid isomer was detected in all 10 strains of Streptomyces tested, and the meso-diaminopimelic acid isomer was detected in all 10 strains of Nocardia tested. Liquid chromatography was compared simultaneously with thin-layer chromatography in the analysis of three strains of aerobic actinomycetes. Liquid chromatography required less growth of the organisms, and analysis was completed within 1 h, compared with the 3 to 5 days required by thin-layer chromatography.

Estrategias alternativas para el diagnóstico de tuberculosis: una opción para los pacientes paucibacilares

“…La fase móvil es la encargada de separar los componentes de la mezcla que fue inyectada en el cromatógrafo en estado líquido, y que es forzada a eluir por una alta presión a través de una colum-na (matriz) cromatográfica [167,169]. Esta matriz (fase estacionaria) puede ser líquida [170] o sólida [169]. La interacción entre los componentes de la mezcla y la fase móvil y la estacionaria definirá su separación y, luego, los componentes pueden ser visualizados por diferentes detectores [167,169].…”

“…Por otro lado, la identificación del ácido tuberculoesteárico (ácido 10-metiloctadecanoico), otro lípido de la pared celular micobacteriana, mediante cromatografía de gases, tiene como ventaja que se ha realizado directamente en muestras clínicas para asociarlo con la presencia de Mycobacterium tuberculosis. El ácido tuberculoesteárico es un ácido graso saturado ramificado que contiene un grupo metilo como sustituyente en la cadena hidrocarbonada [187], que fue aislado inicialmente por Anderson y Chargaff (1929) [188] a patir de cepas de Mycobacterium tuberculosis, pero que luego fue demostrado en otras especies del género Mycobacterium y en un número limitado de bacterias del orden Actinomycetales, como las nocardias y las corinebacterias [130,170,173,189,190]. Aunque su presencia no es exclusiva de Mycobacterium tuberculosis, las demás bacterias que lo producen no tienen mayor importancia como patógenos humanos, de modo que su detección, junto Volumen 23, Números 11-12, 2017…”

Regulatory mutants of Streptomyces clavuligerus affected in free diaminopimelic acid content and antibiotic biosynthesis

“…The separation was carried out on a C18 Radial-PAK cartridge (8 mm by 10 cm, Waters) by employing the Waters RCM-100 Radial Compression Module. The mobile phase used was prepared as described previously (14) by mixing an aqueous solution of 6 mM tetrabutyl ammonium phosphate buffer (pH 6.5) and acetonitryl in a ratio of 58:42. The flow rate (1.5 ml/min) created a pressure of 1,000 lb/in2.…”