Resistência de células de carcinoma epidermóide bucal à terapia fotodinâmica mediada pelo ácido 5-aminolevulínico

Abstract

A minha Orientadora, Prof a . Dr a . Luciana Corrêa, por sempre ouvir e discutir comigo todas as questões e dúvidas que surgiram durante o desenvolvimento desta tese e por ser essa pessoa tão generosa, inteligente e acessível. Admiro-a muito como pessoa e pesquisadora.Ao Prof. Dr. Moacir Novelli, que durante suas visitas ao laboratório sempre alegrava meu dia e por compartilhar comigo um pouco da sua imensa sabedoria. A Marina, a única companheira de profissão da Pós, que sempre esteve disposta a me ajudar e me ouvir, pela amizade, carinho e companheirismo. Pelos nossos cafés da manhã que sempre tornava meu dia mais leve e agradável.A Karla, pelo bom humor constante que sempre alegrava meu dia, por sempre me ouvir, me apoiar e pelos nossos cafezinhos.A Gabriela, por sempre estar ao meu lado me dando força e apoio, pelos nossos almoços diários na copa do departamento que tornavam meu dia mais alegre e por todo carinho e amizade.A Lara, pela amizade e por todo carinho e apoio. Por ser essa pessoa tão agradável e acessível por sempre estar disposta a me ourvir. Tenho a impressão de ter sido uma criança brincando à beira-mar, divertindo-me em descobrir uma pedrinha mais lisa ou uma concha mais bonita que as outras, enquanto o imenso oceano da verdade continua misterioso diante de meus olhos". Oral squamous cell carcinoma (SCC) is a malignant tumor with high morbidity and mortality rates, and it is difficult to treat. Conventional treatment for oral SCCs includes surgery and radiotherapy that may be followed by chemotherapy. Although these treatments are widely used, they are ineffective against some resistant tumors. Isaac Newton RESUMOOncologic photodynamic therapy (PDT) has been used as an adjuvant treatment for oral SCCs, especially in less invasive cases that require tumor reduction before surgical resection. However, like conventional treatments, PDT can induce the occurrence of resistant cell populations such as cutaneous carcinomas and colon and breast adenocarcinomas. The hypothesis that oral SCCs develop resistance to PDThas not yet been tested. Therefore, the aims of this study were to investigate whether oral SCCs (SCC9) develop resistance to several cycles of 5-aminolevulinic acidmediated PDT (5-ALA-PDT) and to determine whether the expression of markers associated with cell survival (NFB, Bcl-2, iNOS, mTOR, and Akt) is altered during this process. An oral SCC (SCC9) cell line was used, which was subjected to the following conditions: 1) Control: cultured without any treatment; 2) ALA: incubated with 5-ALA (1 mM for 4 h); 3) LED: treated with LED light (630 nm, 5.86 J/cm 2 , 22.5 J, 150 mW, 150 s); and 4) PDT: treated with 5-ALA-PDT (with the protocols of the ALA and LED groups combined) generating a lethal dose of 90%. Initially, only one cycle of PDT was administered, and cell viability was determined in all groups 24, 48, 72, and 120 h after irradiation. Subsequently, the DNA fragmentation detection assay (TUNEL) and immunofluorescence analysis of the expression of proteins NFB, Bcl-2, iNOS, pmTOR, ...