Stir bar-sorptive extraction, solid phase extraction and liquid-liquid extraction for levetiracetam determination in human plasma: comparing recovery rates

Abstract

Levetiracetam (LEV), an antiepileptic drug (AED) with favorable pharmacokinetic profile, is increasingly being used in clinical practice, although information on its metabolism and disposition are still being generated. Therefore a simple, robust and fast liquid-liquid extraction (LLE) followed by highperformance liquid chromatography method is described that could be used for both pharmacokinetic and therapeutic drug monitoring (TDM) purposes. Moreover, recovery rates of LEV in plasma were compared among LLE, stir bar-sorptive extraction (SBSE), and solid-phase extraction (SPE). Solvent extraction with dichloromethane yielded a plasma residue free from usual interferences such as commonly co-prescribed AEDs, and recoveries around 90% (LLE), 60% (SPE) and 10% (SBSE). Separation was obtained using reverse phase Select B column with ultraviolet detection (235 nm . The intra-and inter-assay precision and accuracy were studied at three concentrations; relative standard deviation was less than 10%. The limit of quantification was 2.8 µg mL -1 . This robust method was successfully applied to analyze plasma samples from patients with epilepsy and therefore might be used for pharmacokinetic and TDM purposes.Uniterms: Levetiracetam/pharmacokinetic. High performance liquid chromatography. Antiepileptic drugs/therapeutic monitoring. Epilepsy/treatment.Levetiracetam, fármaco antiepiléptico com perfil farmacocinético favorável, tem sido cada vez mais utilizado na prática clínica, embora informações sobre seu metabolismo e disposição cinética ainda estejam sendo geradas. Um método simples, robusto e rápido de extração líquido-líquido seguido por análise por cromatografia líquida de alta eficiência é aqui descrito para servir tanto a investigações farmacocinéticas quanto à monitorização terapêutica. Além disso, as taxas de recuperação do levetiracetam em plasma foram comparadas entre a extração líquido-líquido, a extração sortiva em barra de agitação e a extração em fase sólida. Extração com o solvente diclorometano resultou em plasma livre de interferentes, tais como fármacos antiepilépticos co-prescritos, e apresentou taxas de recuperação em torno de 90% (extração líquido-líquido), 60% (extração em fase sólida) e 10% (extração sortiva em barra de agitação). A separação foi obtida utilizando-se coluna de fase reversa Select B e detecção ultravioleta (235 nm). A fase móvel foi composta por metanol:tampão acetato de sódio 0,125 M pH 4,4 (20:80, v/v). O método mostrou-se linear para o intervalo de 2,8 a 220,0 µg mL -1. Precisão intra-e interdias e a exatidão foram avaliadas em três concentrações; o desvio padrão relativo foi inferior a 10%. O limite de quantificação foi 2.8 µg mL . Este método foi aplicado para análise de amostras de plasma de pacientes com epilepsia e, desta forma, pode ser utilizado satisfatoriamente tanto para fins de farmacocinética quanto de monitorização terapêutica.Unitermos: Levetiracetam/farmacocinética. Cromatografia líquida de alta eficiência. Antiepiléticos/ monitorização terapêutica. Epilepsia/trata...

An overview of the Brazilian contributions to Green Analytical Chemistry

“…however, low recoveries were observed for complex matrices. For example, Freitas-lima et al (2015) reported recoveries of 10 and 60% of an anticonvulsant drug spiked to plasma by SBSe and classical SPe, respectively, and both procedures required the same eluent volume.…”

Determination of Levetiracetam in Human Plasma by Dispersive Liquid-Liquid Microextraction Followed by Gas Chromatography-Mass Spectrometry

“…These methods include high-performance liquid chromatography (HPLC) and gas chromatography (GC) with various detection systems [9–24]. Moreover, previously reported methods are mainly based on the conventional sample preparation procedure such as liquid-liquid extraction (LLE), solid-phase extraction (SPE), and plasmatic protein precipitation (PPP) [9–23]. The PPP procedure is considered a fast and easy method to remove the plasmatic protein; however, this procedure can result in signal suppression when liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC/MS) is used due to the presence of a precipitation agent, the coprecipitation of interfering species, and a lack of selectivity.…”