Strongyloides stercoralis diagnostic polypeptides for human strongyloidiasis and their proteomic analysis

Abstract

Human strongyloidiasis is a deleterious gastrointestinal disease mainly caused by Strongyloides stercoralis infection. Strongyloides stercoralis is a soil-transmitted helminthiasis that is distributed around the globe. Although definitive diagnosis is carried out through the detection of parasite objects in human stool samples, the development of reliable immunological assays is an important alternative approach for supportive diagnosis. We characterized the two sensitive and specific bands of S. stercoralis filariform larvae that reacted with human strongyloidiasis sera based on immunoblot analysis. Serum samples obtained from strongyloidiasis patients showed a sensitivity of 90 and 80 % at the approximate molecular mass of 26 and 29-kDa polypeptide bands, respectively. The reactive specificity of the 26-kDa band was 76.5 % while for the 29-kDa band was 92.2 %. Proteomic analysis identified the 26-kDa band protein was 14-3-3 protein zeta, while the 29-kDa band protein was ADP/ATP translocase 4. The results provided a basic framework for further studies regarding the potential of the S. stercoralis recombinant antigen to become a leading to diagnostic tool.

Análise proteômica dos estágios evolutivos de larva filarioide e fêmea parasita de Strongyloides venezuelensis

“…No contexto do gênero Strongyloides poucos estudos têm sido realizados até o presente. Recentemente, alguns autores utilizaram a análise proteômica para caracterizar as proteínas de S. stercoralis [74][75][76] e de outras espécies como S. ratti 77 e S. venezuelensis 78,79 . Estes estudos têm apontado para diversas proteínas que podem estar relacionadas com a relação parasito-hospedeiro, principalmente na regulação da resposta imune do hospedeiro e ainda apontam algumas que podem ser aplicadas no imunodiagnóstico.…”

“…83,84 Os recentes estudos têm demonstrado a possiblidade de utilização das galectinas no imunodiagnóstico da estrongilodiíase humana e experimental 118 . A galectina foi destacada em estudos proteômicos como um alvo promissor para o diagnóstico da infecção por S. stercoralis 75,122 . Além disso, foi recentemente demonstrada a expressão diferencial das galectinas nos produtos de secreção/excreção de diferentes estágios de S. ratti 77,118…”

“…e Echinococcus spp, a proteína Zeta14-3-3 foi caracterizada em diferentes estágios do desenvolvimento parasitário148 , e o seu papel na proliferação e sobrevivência dos parasitos apontaram para promissores candidatos vacinais. No contexto do diagnóstico da estrongiloidíase, proteínas zeta 14-3-3 tem sido apontada como promissores marcadores, sendo reconhecida por soros de pacientes infectados com S. stercoralis75 . Recentemente, um recombinante 14-3-3 foi aplicado no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana134 , apresentando bons resultados de sensibilidade e especificidade.…”

“…A função das galectinas nos nemátodos ainda não está bem compreendida, parece estar relacionada com a sobrevivência do parasita, desempenhando importante papel importante na relação parasita-hospedeiro, modulando negativamente a resposta imune150 . As galectinas foram identificadas em larvas infectantes de S. stercoralis74,75,76 , como produto de secreção/excreção dos estágios de FP e L3 de S. ratti77 . Porém, mais estudos podem auxiliar no entendimento das galectinas no gênero Strongyloides.…”

“…Goulart de Carvalho et al 152 demonstraram bandas imunorreativas de 17, 38 e 50kDa usando extratos alcalinos de larvas de S. venezuelensis na estrongiloidiase experimental.Pode-se destacar que no presente estudo ocorreu o reconhecimento da banda de 30-40kDa nas fases aguda e de recuperação da infecção. Essa faixa de massa tem sido citada por vários autores75,122,155 como sendo de grande importância para o diagnóstico de estrongiloidíase humana. O nosso grupo 122 identificou as proteínas presentes na faixa de 30-40kDa utilizando a proteômica, e dentre os constituintes proteicos tem-se destaque para as galectinas.…”