Syp1 is a conserved endocytic adaptor that contains domains involved in cargo selection and membrane tubulation

Abstract

Internalization of diverse transmembrane cargos from the plasma membrane requires a similarly diverse array of specialized adaptors, yet only a few adaptors have been characterized. We report the identification of the muniscin family of endocytic adaptors that is conserved from yeast to human beings. Solving the structures of yeast muniscin domains confirmed the unique combination of an N‐terminal domain homologous to the crescent‐shaped membrane‐tubulating EFC/F‐BAR domains and a C‐terminal domain homologous to cargo‐binding μ homology domains (μHDs). In vitro and in vivo assays confirmed membrane‐tubulation activity for muniscin EFC/F‐BAR domains. The μHD domain has conserved interactions with the endocytic adaptor/scaffold Ede1/eps15, which influences muniscin localization. The transmembrane protein Mid2, earlier implicated in polarized Rho1 signalling, was identified as a cargo of the yeast adaptor protein. These and other data suggest a model in which the muniscins provide a combined adaptor/membrane‐tubulation activity that is important for regulating endocytosis.

Molecular Structure, Function, and Dynamics of Clathrin-Mediated Membrane Traffic

“…(D) Epsin ENTH domain with the PtdIns(4,5)P 2 head group (PDB 1H0A) (Ford et al 2002). (E) FCHo F-BAR domain and mhomology domain (MHD); structure of the former from FCHo2 (PDB 2V0O) (Henne et al 2007) and of the latter from the yeast homolog Syp1 (PDB 3G9H) (Reider et al 2009). The F-BAR domain binds preferentially to a curved membrane bilayer.…”

Initiation de l’endocytose par vésicules de clathrine

“…Chez la levure Saccharomyces cerevisiae, il existe un seul homologue, le gène SYP1 (suppressor of yeast profilin deletion). La protéine Syp1 a aussi été détectée au tout début de la formation des vésicules de clathrine [29,30]. Contrairement aux autres protéines associées à la formation des puits de clathrine, les FCHo ne sont pas présen-tes dans les vésicules de clathrine, le « produit final » [15,16].…”

“…Ce dernier est un domaine de séquence et de structure similaires à la sous-unité μ2 de l'adaptateur AP2, présent dans les protéines FCHo et SGIP1 (SH3-containing GRB2-like protein 3-interacting protein 1) [29]. Les protéines FCHo ne se lient directement ni à AP2 ni à la clathrine [28].…”

“…Les protéines FCHo ne se lient directement ni à AP2 ni à la clathrine [28]. En revanche, via leur domaine μHD, elles forment un complexe direct avec plusieurs autres protéines impliquées dans la formation des vésicules de clathrine, en particulier Eps15 (epidermal growth factor receptor substrate 15) et Eps15R et les intersectines [28,29]. Ces dernières se lient aussi à AP2, à la clathrine et à plusieurs autres protéines importantes pour la formation de vésicules, telle la dynamine.…”

“…Le domaine F-BAR des protéines FCHo joue un rôle crucial dans leurs fonctions. Des mutations visant à réduire leur dimérisation ou leur capacité à se lier aux membranes suffisent à abolir la capacité des protéines FCHo à induire la formation de puits de clathrine [28,29]. De plus, la capacité des FCHo à « sculpter » la membrane plasmique à travers leurs domaines F-BAR est cruciale pour la progression des puits de clathrine en vésicules.…”