Objetivo: analisar a atuação do enfermeiro na aplicação do Checklist de Cirurgia Segura em hospital universitário na visão ecossistêmica. Método: estudo descritivo-exploratório com sete enfermeiros do centro cirúrgico de um hospital universitário na região Sul do Brasil. Os dados foram coletados por meio de entrevista semiestruturada de março e abril de 2022, organizados com auxílio do software NVvivo, e submetidos a Análise de Conteúdo Temático. Resultados: resultaram em duas categorias temáticas: Equipe de trabalho multiprofissional e Competências do enfermeiro frente ao Checklist de Cirurgia Segura, discutidas entrelaçadas com os princípios ecossistêmicos. Conclusões: a atuação do enfermeiro é ativa, reconhecendo suas responsabilidades. Entretanto, encontra-se barreiras que envolve a falta de interação e cooperação com a equipe de trabalho, dimensionamento inadequado da equipe de enfermagem e desenvolvimento de competências da equipe multiprofissional.