Um experimento de análise em fluxo envolvendo reações enzimáticas e quimiluminescência

Abstract

Recebido em 7/3/03; aceito em 13/8/03A FLOW ANALYSIS EXPERIMENT INVOLVING ENZYMATIC REACTIONS AND CHEMILUMINESCENCE. An experiment is proposed to introduce some fundamentals of flow analysis, chemiluminescence and kinetic monitoring of enzymatic reactions in undergraduate courses. Chemiluminescence detection is performed with a simple spectrophotometer equipped with a lab-made spiral flow cell constructed from a polyethylene tube. The hydrogen peroxide produced by the glucose oxidation in the presence of glucose oxidase is continuously monitored by the reaction with luminol in alkaline media in a flow injection system. The exercise allows also the discussion of important analytical features and the comparison with different optical methods of analysis.Keywords: chemiluminescence; flow analysis; enzymatic reactions. INTRODUÇÃOO desenvolvimento da Química e os trabalhos de interface com áreas correlatas têm gerado grandes desafios para o ensino desta ciên-cia. Um deles é a necessidade de incluir uma quantidade cada vez maior de conceitos, técnicas e informações importantes, sem que haja aumento do tempo dedicado às diferentes disciplinas. Uma alternativa para este problema é a proposição de experimentos que associem diferentes informações, permitindo explorar melhor o tempo disponível e, ao mesmo tempo, reduzir gastos. Essa estratégia também permite demonstrar que a compartimentalização da Química em diferentes áreas é artificial 1 , visto que a interpretação dos fenômenos com que o aluno se depara no dia-a-dia requer uma abordagem diferente, que utilize os conceitos químicos de maneira unificada e associada para seu entendimento. Os diferentes conceitos e técnicas introduzidos nas disciplinas de Química Analítica, por exemplo, são indispensáveis para a obtenção de informações relacionadas às outras disciplinas.Neste contexto, é proposto um experimento para alunos de graduação em Química e áreas correlatas, que permite introduzir conceitos relacionados à análise em fluxo, quimiluminescência, reações enzimáticas e cinética química. A reação de oxidação da glicose na presença de glicose oxidase (GOD) foi estudada através do monitoramento da quimiluminescência da oxidação do luminol pelo peróxido de hidrogênio produzido. Uma cela em espiral construída com tubo de polietileno e adaptada a um espectrofotômetro simples permite efetuar medidas por quimiluminescência com equipamentos usuais em laboratórios de ensino. QUIMILUMINESCÊNCIALuminescência é um termo empregado para descrever a emissão de radiação quando uma molécula ou átomo no estado excitado decai para o seu estado fundamental 2 . Os vários tipos de luminescência são caracterizados em função da fonte de energia empregada para se obter o estado excitado. Na quimiluminescência, a energia de excitação é proporcionada por uma reação química, sendo a emissão de radiação observada geralmente nas regiões do visível ou infravermelho próximo 3,4 . Esse processo pode ser simplificadamente representado pela Equação 1, onde A e B representam os reagentes, AB* o intermediár...

Determinação de paracetamol pela inibição da reação quimiluminescente do luminol-hipoclorito de sódio em um sistema de análise em fluxo empregando o conceito de multicomutação

“…20 e uma cela de fluxo em polietileno. 21 Mais detalhes do sistema de detecção podem ser obtidos na ref. 21.…”

A critical evaluation of a flow‐cell based on a liquid core waveguide for chemiluminescence measurements

“…This is a critical aspect, because the radiation is emitted in all directions, being necessary to adapt the cell geometry and positioning in relation to the detection system (2). Thus, several cell configurations have been proposed, being usually employed spiral cells, positioned in front of the detection system (3)(4)(5). Campins-Falcó et al (4) evaluated different cell configurations, aiming to improve sensitivity and precision.…”

Atualizando a química orgânica experimental da licenciatura

“…Muitos são os autores [3][4][5][6][7] interessados em elaborar experimentos mais atuais e motivadores, utilizando maneiras diferentes de tratamentos e interpretações de resultados. Mas um curso de licenciatura em Química no período noturno, ainda enfrenta o problema do curto espaço de tempo (3 a 4 h) reservado para uma prática de laboratório.…”