Verbesserung der Dispersion der chemischen Verschiebungen von unstrukturierten Proteinen durch einen kovalent gebundenen Lanthanoidkomplex

Abstract

Die Erforschung von intrinsischu nstrukturierten Proteinen (IDPs) mit NMR-spektroskopischen Methoden wird oftmals durch starke Überlagerung der Proteinsignale erschwert. Dies führt zu uneindeutigen Zuordnungen dieser Signale und erschwert die Datenanalyse,i nw elcher oftmals eine gute Separierung der Signale die Grundlage der Dateninterpretation bildet. In dieser Arbeit berichten wir von der Mçglichkeit, einen Lanthanoidkomplex kovalent an das Zielprotein zu binden, der zu einer erhçhten Dispersion der Signale führt. Wir zeigen diesen Effekt an Proteinen mit sich wiederholenden Aminosäuresequenzen, welche somit besonders von Signalüberlappung betroffen sind. Die Bindung eines DOTA-basierten Lanthanoidkomplexes an ein Cystein führt zu pseudochemischenV erschiebungen (PCS), die nochi n mehr als 20 Aminosäureresten entfernten Regionen detektierbar sind. Die stark erhçhte Dispersion der beobachteten Signale führt zu einer beträchtlichen Erleichterung in der Zuordnung und Datenauswertung.