Wolbachia spp. interfere na detecção molecular de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães com microfilaremia

Abstract

Comunicação [Communication] Wolbachia spp. interfere na detecção molecular de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães com microfilaremia [Wolbachia spp. interferes (Unver et al., 2003). Anaplasma platys e várias espécies de Ehrlichia spp., inclusive E. canis, desenvolvem doença clínica em diferentes espécies de hospedeiros além do cão doméstico. Wolbachia spp., endossimbionte de insetos, aracnídeos, crustáceos e nematódeos, também pertence à família Anaplasmataceae (Unver et al., 2003;Hartelt et al., 2004 A pesquisa do DNA através de PCR, usando iniciadores ou "primers" baseados no gene 16S RNAr, permite a detecção de várias espécies da família Anaplasmataceae, inclusive do gênero Wolbachia, e têm sido usados em pesquisas em diferentes materiais biológicos, como invertebrados, sangue e outros tecidos de animais e humanos (Inokuma et al., 2000;Hartelt et al., 2004, Martin et al., 2005. Wolbachia spp. pode interferir na PCR de amostras de sangue de cães para detecção de hemoparasitas da familia Anaplasmataceae (Hartelt et al., 2004). O presente relato descreve essa interferência em testes para pesquisa de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em sangue de cães da região litorânea do Rio de Janeiro. et al., 2003), sendo que não houve evidência de microfilaremia, e os autores discutiram a possibilidade de que essa bactéria estivesse associada a quadro fisiopatogênico. No caso do presente estudo, as amostras eram de cães microfilarêmicos e, provavelmente, havia uma concentração elevada do DNA de Wolbachia spp., o que explica a presença de fortes bandas na revelação em gel e dificultaria a detecção de outras espécies da mesma família taxonômica.O sequenciamento foi feito a partir do produto amplificado dos iniciadores para amplificar DNA de todos os membros de Anaplasmataceae (Inokuma et al., 2000); portanto, não se pode descartar a possibilidade da presença de DNA de mais do que uma espécie dessa família. Estudos mostraram que, mesmo quando existiam mais de uma bactéria Anaplasmataceae na amostra clínica, a concentração de DNA que predominava poderia interferir na positividade quando utilizados iniciadores baseados no gene 16S rRNA (Hancock et al., 2001;Suksawat et al., 2001 Suksawat et al., , com correção dos autores em 2002Hartelt et al., 2004