Εφαρμογή Νέων Ενισχυτών Σήματος Χημειοφωταύγειας Για Την Ανάπτυξη Ενζυμοανοσοχημικών Προσδιορισμών Υψηλής Ευαισθησίας

Abstract

Βασικά διαλύματα…………………………………………………………………………………………….71 ΚΕΦΑΛΑΙΟ 4 ο ΕΦΑΡΜΟΓΗ π -ΥΠΟΚΑΤΕΣΤΗΜΕΝΩΝ ΦΑΙΝΟΛΙΚΩΝ ΠΑΡΑΓΩΓΩΝ ΓΙΑ ΕΝΙΣΧΥΣΗ ΣΗΜΑΤΟΣ CL 4.1 Εισαγωγή…………………………………………………………………………………………………..72 4.2 Αντιδραστήρια…………………………………………………………………………………………….72 4.3 Πειραματικές συνθήκες…………………………………………………………………………………75 4.4 Πρωτόκολλο βιοτινυλίωσης της HRP…………………………………………………………………77 4.5 Εύρεση βέλτιστης συγκέντρωσης ενισχυτή………………………………………………………….80 ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ 8 4.6 Σύγκριση της ικανότητας ενίσχυσης CL των 24 μορίων………………………………………….85 4.7 Αξιολόγηση των αποτελεσμάτων -Συμπεράσματα…………………………………………………87 ΚΕΦΑΛΑΙΟ 5 ο ΕΦΑΡΜΟΓΗ ΑΝΝ ΣΕ ΜΕΛΕΤΗ QSPR ΓΙΑ ΤΗΝ ΠΡΟΒΛΕΨΗ ΤΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΕΝΙΣΧΥΣΗΣ ΣΗΜΑΤΟΣ ΧΗΜΕΙΟΦΩΤΑΥΓΕΙΑΣ π -ΥΠΟΚΑΤΕΣΤΗΜΕΝΩΝ ΦΑΙΝΟΛΩΝ 5.1 Εισαγωγή…………………………………………………………………………………………………..90 5.1.1 Περιγραφή μορίων με ποσοτικές παραμέτρους……………………………………………….90 5.1.2 Τεχνικές συσχέτισης για την ανάπτυξη μίας μελέτης QSPR………………………………..91 5.2 Σχεδιασμός ανάπτυξης ΑΝΝ για μελέτη QSPR των π -υποκατεστημένων φαινολών ως ενισχυτών χημειοφωταύγειας…………………………………………….…………………………….92 5.2.1 Συλλογή δεδομένων………………………………………………………………………………...92 5.2.2 Προ-επεξεργασία βάσης δεδομένων……………………………………………………………..93 5.2.3 Διαίρεση της βάσης δεδομένων…………………………………………………………..………94 5.2.4 Επιλογή και μέτρα απόδοσης ΑΝΝ……………………………………………………………...96 5.3 Πολυστοιβαδικό Προς-τα-εμπρός δίκτυο συζευγμένο με γενετικό αλγόριθμο……………….99 5.4 Αξιολόγηση ΑΝΝ………………………………………………………………………………………..102 5.5 Συμπεράσματα-Προοπτική………………………………………………………………………..…104 ΚΕΦΑΛΑΙΟ 6 ο ΜΕΛΕΤΗ ΚΙΝΗΤΙΚΗΣ ΣΗΜΑΤΟΣ ΧΗΜΕΙΟΦΩΤΑΥΓΕΙΑΣ 6.1 Εισαγωγή…………………………………………………………………………………………….…..106 6.2 Αντιδραστήρια…………………………………………………………………………………………..106 6.3 Πειραματικές συνθήκες……………………………………………………………………………….107 6.4 Συσχέτιση έντασης και κινητικής CL……………………………………………………………….112 6.5 Διερεύνηση της αιτιολογίας πτώσης του σήματος………………………………………..………115 6.6 Συμπεράσματα………………………………………………………………………………………….117 ΚΕΦΑΛΑΙΟ 7 ο ΣΤΑΘΕΡΟΠΟΙΗΣΗ ΣΗΜΑΤΟΣ CL ΣΤΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΛΟΥΜΙΝΟΛΗ/HRP/H2O2 ΜΕ ΕΝΙΣΧΥΤΗ ΣΗΜΑΤΟΣ ΤΟ 4-ΙΜΡ 7.1 Εισαγωγή…………………………………………………………………………………………………119 7.2 Αντιδραστήρια…………………………………………………………………………………………..119 7.3 Πειραματικές συνθήκες……………………………………………………………………………….119 7.3.1 Έλεγχος σταθεροποίησης σήματος με χρήση επιφανειοδραστικών ουσιών…………….120 7.3.2 Έλεγχος σταθεροποίησης σήματος με χρήση β-κυκλοδεξτρίνης…………………………123 7.3.3 Έλεγχος σταθεροποίησης σήματος με χρήση πολυπεπτιδίων-πρωτεϊνών……………….124