Λιποσώματα Ως Φορείς Αλκυλολυσοφωσφολιπιδίων Και Μιτομυκίνης C

Abstract

ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΜΕΛΕΤΗΣ 45 3 ΥΛΙΚΑ ΚΑΙ ΜΕΘΟΛΟΙ 47 3.1 Υλικά 47 3.2 Μέθοδοι παρασκευής λιποσωμάτων 47 3.2.1 Εξώθηση μέσω φίλτρων (extrusion 47 3.2.2 Εξάτμιση υδατικής φάσης γαλακτώματος (reverse phase evaporation) 48 3.3 Χαρακτηρισμός λιποσωμάτων 3.3.1 Προσδιορισμός μεγέθους λιποσωμάτων 3.3.2 Προσδιορισμός της ενσωμάτωσης της OMMC στα λιποσώματα 3.3.3 Προσδιορισμός της ενσωμάτωσης της HMMC στα λιποσώματα 3.4 Σταθερότητα στο πλάσμα 3.4.1 Παραλαβή πλάσματος 53 3.4.2 Λιποσώματα με παράγωγα της μιτομυκίνης C 3.4.2.1 Παρασκευή λιποσωμάτων 3.4.2.2 Επωάσεις 3.4.2.3 Μελέτη της απομάκρυνσης της HMMC από τα λιποσώματα 3.4.2.4 Χρωματογραφία λεπτής στιβάδας 3.4.3 Λιποσώματα με μόνο δραστικό συστατικό το Et-18-OMe 3.4.3.1 Δοκιμασία σταθερότητας με καλσείνη 3.4.3.2 Απομάκρυνση λιπιδίων από τα λιποσώματα 58 3.4.3.3 Απομάκρυνση του Et-18-OMe από τα λιποσώματα 58 3.5 Κυτταροτοξικότητα λιποσωμάτων in vitro 59 3.5.1 Κυτταρικές σειρές 59 3.5.2 Διαλύματα κυτταροκαλλιεργειών 60 3.5.3 Συντήρηση των κυτταροκαλλιεργειών 61 3.5.4 Επίδραση λιποσωματικής και ελεύθερης HMMC στα κύτταρα 61 4 ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ 64 4.1 Λιποσώματα με δραστικά συστατικά το αλκυλολυσοφωσφολιπίδιο Et-18-OMe και τα παράγωγα της μιτομυκίνης C, OMMC και HMMC 64 4.2 OMMC Λιποσώματα 65 4.2.1 Χαρακτηρισμός των OMMC-λιποσωμάτων 65 4.3 HMMC Λιποσώματα 74 4.3.1 Χαρακτηρισμός των HMMC-λιποσωμάτων 74 4.3.1.1 Μέγεθος ομοιογένεια σταθερότητα 74 4.3.1.2 Ενσωμάτωση της HMMC στα λιποσώματα 79 4.3.2 Σταθερότητα στο πλάσμα 4.3.2.1 Ακεραιότητα των λιποσωμάτων στο πλάσμα 4.3.2.2 Διατήρηση της HMMC στα λιποσώματα 4.3.3 Κυτταροτοξικότητα των HMMC-λιποσωμάτων in vitro 4.4 Λιποσώματα με μόνο δραστικό συστατικό το αλκυλολυσο φωσφολιπίδιο Et-18-OMe 4.5 Λιποσώματα με τη μέθοδο της εξάτμισης υδατικής φάσης γαλακτώ ματος 4.6 Λιποσώματα με τη μέθοδο της εξώθησης μέσα από φίλτρα 4.6.1 Παρασκευή -Χαρακτηρισμός 107 4.6.2 Σταθερότητα στο πλάσμα 4.6.2.1 Δοκιμασία καλσείνη ς 114 4.6.2.2 Απομάκρυνση λιπιδίων από τα λιποσώματα 127 4.6.2.3 Απομάκρυνση του Et-18-OMe από τα λιποσώματα 5 ΣΥΖΗΤΗΣΗ 135 5.1 Λιποσώματα με δραστικά συστατικά το αλκυλολυσοφωσφολιπίδιο Et-18-OMe και τα παράγωγα της μιτομυκίνης C, OMMC και HMMC 135 5.2 Λιποσώματα με μόνο δραστικό συστατικό το αλκυλολυσο-