АНАЛИЗ ПРОФИЛЯ ТРАНСКРИПЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ РЯДА ДЛИННЫХ НЕКОДИРУЮЩИХ РНК У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА

Abstract

Показано, что эпигенетическая регуляция играет важную роль в развитии метаболических заболеваний,
 ожирения, сахарного диабета 2 типа (СД2) поскольку эпигенетические механизмы принимают активное
 участие в регуляции уровня глюкозы, метаболизма липидов и процессах воспаления (Zhong, H., 2020).
 Активно изучается роль днРНК в патогенезе СД2. Сообщалось, что LncRNA регулируют гомеостаз глюкозы
 и функцию β-клеток.
 ЦЕЛЬ: анализ профиля экспрессии генов длинных некодирующих РНК: lncRNA - TP53TG1, lncRNA -
 LINC00342, lncRNA - H19, lncRNA - MALAT1, lncRNA - MEG3 у пациентов с СД2 и в контроле.
 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: для анализа профиля экспрессии были сформированы базы биологиче-
 ского материала РНК, выделенной из мононуклеарных клеток периферической крови (N=54 пациентов
 СД2) и контрольной группы (N=34). Тотальная РНК была из мононуклеарных клеток периферической
 крови. Синтез кДНК проведен с использованием набора «Набора реактивов MMLV RT kit» Евроген, Россия
 (www.evrogen.ru) с использование гексамерного рандомного праймера. Исследование экспрессии генов
 lncRNA проведено на приборе StepOnePlus, Applied Biosystems, США в формате 96 луночных планшет
 в 25 мкл реакционной смеси, содержащей специфические праймеры и целевой флуоресцентный зонды
 фирмы «ДНК-Синтез» (Россия) и реагенты для ПЦР «qPCRmix-HS HighROX» (Евроген, Россия). В качестве
 эндогенного контроля использован ген домашнего хозяйства (B2M), характеризующийся относительно
 постоянной экспрессией в разных тканях. Относительный уровень экспрессии оценивали с помощью ddСt
 метода (Livak KJ, Schmittgen TD, 2001). В каждую реакцию включали отрицательный контроль. В качестве
 референсного образца использовали образцы контрольной группы, ПЦР для каждого образца повторяли
 трижды. Различия в уровне относительной экспрессии между группой больных и контроля рассчитывали
 с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни SPSS.
 РЕЗУЛЬТАТЫ: проведен анализ профиля экспрессии 5 днРНК, вовлеченных в процессы развития инсу-
 линовой резистентности в периферической крови у больных СД2 и здоровых индивидов методом OT-ПЦР.
 В общей группе пациентов СД2 наблюдалось снижение уровня экспрессии днРНК LINC00342 в 3.81раза
 (Р=0.0036), снижение уровня экспрессии днРНК MALAT1 в -7,83 раза (Р=0.003). Снижение экспрессии днРНК
 MEG3 в 4,78 раза было выявлено на уровне тенденции (Р=0.091). Анализ экспрессии днРНК H19 никаких
 изменений при сравнении групп не выявило.
 Наблюдаемое снижение экспрессиидн РНК MALAT1 и LINC00342 может быть связано с лечением метфор-
 мином, поскольку пациенты проходилии стационарное лечение. Также рядом исследователей выявлено,
 что уровень экспрессии днРНК снижается в мышцах как у людей с СД2, так и среди инсулинорезистентных
 мышей (Gao et al., 2014). Вместе с тем ряд авторов выявляют увеличение экспрессии днРНК у больных СД2.
 Получаемые противоречивые данные в отношении экспрессии днРНК требуют тщательного дальнейшего
 анализа.