Молекулярна Ідентифікація Білка Пептидоглікану Короткого Типу, GMPGRP-Sc Від Grapholitha Molesta

Abstract

Білок розпізнавання пептидогліканів (PGRP) є важливим рецептором розпізнавання паттернів, який міститься як у безхребетних, так і у хребетних. Він відіграє важливу роль в антибактеріальному імунітеті, завдяки своїй помітній здатності виявляти та усувати збудника інфекції. Однак PGRP, в основному ідентифіковано з Drosophila melanogaster та Bombyx mori, а щодо інших сільськогосподарських комах повідомлень мало про їхні функції та механізм. У цьому дослідженні короткотиповий ген PGRP під назвою GmPGRP-SC був ідентифікований у Grapholitha molesta – східної плодожерки (OFM) – на основі аналізу бази даних груп транскрипції OFM з нашої лабораторії та Національного центру інформації з біотехнологій (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/). GmPGRP-SC містить домен PGRP і має найтісніший генетичний зв'язок з геном PGRP Leguminivora glycinivorella, відповідно до послідовності та філогенетичного аналізу. Метод ПЛР у реальному часі було використано для аналізу картини його експресії на стадіях розвитку OFM та в різних тканинах личинки OFM. Наразі, відносно рівні експресії гена GmPGRP-SC в OFM були проаналізовані після інфікування Beauveria bassiana. Результати показали, що загальна кДНК від GmPGRP-SC становила 3221 bp (базових, основних пар), а кодуючі області – 2268 bp, що кодують 756 амінокислотних залишків. Рівень експресії GmPGRP-SC був найвищим у стадії лялечки OFM. Водночас, у різних тканинах OFM його відносна експресія була вищою в епітелії та гемоциті, тоді як іншим стадіям та тканинам притаманна порівняно нижча та з невеликою різницею. Рівень експресії GmPGRP-SC був істотно різним, коли суспензія спор B. bassiana становить 105 конідій/мкл, інфікованих через 48 годин. Тоді, коли суспензія спор B. bassiana становить 107 конідій/мкл, рівень експресії GmPGRP-SC також був різним. Усі ці результати закладуть основу для вивчення ролі та функцій GmPGRP-SC у вродженому імунітеті OFM, а також сприятимуть подальшому вивченню молекулярної взаємодії між OFM та B. bassiana. Результати досліджень можуть допомогти знайти потенційні молекули-мішені та забезпечити наукову основу для розробки нових біогенних пестицидів та реалізації Зеленої боротьби зі шкідниками (GPM).