Currently, an ultrastructural analysis of cardiovascular tissues is significantly complicated. Routine histopathological examinations and immunohistochemical staining suffer from a relatively low resolution of light microscopy, whereas the fluorescence imaging of plaques and bioprosthetic heart valves yields considerable background noise from the convoluted extracellular matrix that often results in a low signal-to-noise ratio. Besides, the sectioning of calcified or stent-expanded blood vessels or mineralised heart valves leads to a critical loss of their integrity, demanding other methods to be developed. Here, we designed a conceptually novel approach that combines conventional formalin fixation, sequential incubation in heavy metal solutions (osmium tetroxide, uranyl acetate or lanthanides, and lead citrate), and the embedding of the whole specimen into epoxy resin to retain its integrity while accessing the region of interest by grinding and polishing. Upon carbon sputtering, the sample is visualised by means of backscattered scanning electron microscopy. The technique fully preserves calcified and stent-expanded tissues, permits a detailed analysis of vascular and valvular composition and architecture, enables discrimination between multiple cell types (including endothelial cells, vascular smooth muscle cells, fibroblasts, adipocytes, mast cells, foam cells, foreign-body giant cells, canonical macrophages, neutrophils, and lymphocytes) and microvascular identities (arterioles, venules, and capillaries), and gives a technical possibility for quantitating the number, area, and density of the blood vessels. Hence, we suggest that our approach is capable of providing a pathophysiological insight into cardiovascular disease development. The protocol does not require specific expertise and can be employed in virtually any laboratory that has a scanning electron microscope.

No abstract

No abstract

Актуальность. Рестеноз является типичным отдаленным осложнением стентирования артерий во взрослом возрасте, однако его патоморфологические особенности в детском возрасте, к примеру между первым и вторым этапами коррекции тетрады Фалло (ТФ), остаются неясными в силу сложности получения и исследования таких препаратов. Цель -изучить особенности ультраструктурного строения стентированных участков выводного отдела правого желудочка (ВОПЖ), извлеченных во время радикальной хирургической коррекции ТФ у маловесных детей. Материал и методы. Исследовано 15 образцов стентированных участков ВОПЖ, извлеченных во время радикальной хирургической коррекции ТФ у маловесных детей. Период стентирования составлял от 2,5 до 6 мес (в среднем 3,2 мес). Образцы фиксировали в забуференном формалине с постфиксацией и окрашиванием тетраоксидом осмия, обезвоживали в этаноле и ацетоне и пропитывали эпоксидной смолой. После полимеризации смолы образцы шлифовали и полировали до нужной глубины. Для повышения электронного контраста образцы обрабатывали спиртовым раствором уранилацетата в процессе обезвоживания и цитратом свинца по Рейнольдсу после полировки эпоксидных блоков. Образцы визуализировали посредством сканирующей электронной микроскопии в режиме обратно-рассеянных электронов. Результаты. Структура извлеченного сосуда характеризовалась иерархичностью и включала 7 слоев: 1) эндотелий; 2) субэндотелиальный слой; 3) плотная волокнистая соединительная ткань с большим количеством коллагеновых волокон, ориентированных параллельно эндотелиальному слою; 4) рыхлая соединительная ткань; 5) плотная соединительная ткань, окружающая стенты; 6) прилегающая к каркасу стента мышечная оболочка (медия) исходного сосуда; 7) адвентиция. В то время как адвентиция имела типичное строение, аналогичное таковому в артериях во взрослом возрасте, эластические волокна медии имели значительно менее выраженную очерченность. Неоинтима стентированного сосуда характеризовалась преобладанием соединительнотканного компонента (внеклеточного матрикса) над клеточным и чередованием плотной и рыхлой соединительной ткани. Стойки стента инкапсулировались при активном участии макрофагов, часть из них трансформировалась в образующие небольшие скопления пенистые клетки. Заключение. После стентирования ВОПЖ как первого этапа коррекции ТФ происходит активное фибротическое ремоделирование, приводящее к формированию неоинтимы с выраженным и гетерогенным соединительнотканным компонентом. Финансирование. Работа выполнена при поддержке комплексной программы фундаментальных научных исследований СО РАН в рамках фундаментальной темы НИИ КПССЗ № 0546-2019-0002 «Патогенетическое обоснование разработки имплантатов для сердечно-сосудистой хирургии на основе биосовместимых материалов, с реализацией пациент-ориентированного подхода с использованием математического моделирования, тканевой инженерии и геномных предикторов». Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Для цитирования: Мухамадияров Р.А., Ляпин А.А., Кутихин А.Г. Ультраструктура стентированного участка выво...

Aim. To evaluate the hospital results of one-stage radical correction (RC) of Fallot's tetrad (TF) and stage-by-stage correction of the defect using stenting of the right ventricular outflow tract (RVOT).Methods. The group of step-by-step correction included 24 patients with the classic cyanotic form of TF: 1st stage – stenting of the RVOT (Me age 73.5 days, weight 3.8 kg), 2nd stage – RC of TF Me age 187 days. The group of one-stage RC TF included 30 newborns with Me aged 121.5 days and weight 5.5 kg.Results. After performing stenting of RVOT, there was a significant increase in SpO2 from 80 to 94%, end diastolic volume of left ventricle index from 24 to 33.3 ml/m2 , a decrease in the severity of hypoplasia of the pulmonary artery trunk (PA) compared with the stage before stenting of RVOT (p˂ 0.05). Patients of the two groups had equal values of weight, SpO2, the severity of PA hypoplasia, and a gradient in the RVOT at the time of RC. After the RC in stenting group there was an increase in SpO2 up to 98%, a decrease in the RVOT gradient from 75 to 16.5 mm Hg, an increase in the end diastolic volume left ventricle index to 56.5 ml/m2 (p˂ 0.05). The dynamics of the status of patients in Group 1 with the use of palliative intervention did not significantly differ from the dynamics in Group 2 (one-stage RC TF).Conclusion. Application of the approach of step-by-step correction of TF with stenting of RVOT in low weight infants with severe hypoxemia demonstrated an equal effect on the dynamics of SpO2, reverse cardiac remodeling compared with patients who underwent simultaneous RC of classical TF.