The objective of this study was to identify the major peptides generated by the in vitro hydrolysis of Amaranthus cruentus protein and to verify the effect of these peptides on the activity of 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase (HMG-CoA reductase), a key enzyme in cholesterol biosynthesis. A protein isolate was prepared, and an enzymatic hydrolysis that simulated the in vivo digestion of the protein was performed. After hydrolysis, the peptide mixture was filtered through a 3 kDa membrane. The peptide profile of this mixture was determined by reversed phase high performance chromatography (RP-HPLC), and the peptide identification was performed by LC-ESI MS/MS. Three major peptides under 3 kDa were detected, corresponding to more than 90% of the peptides of similar size produced by enzymatic hydrolysis. The sequences identified were GGV, IVG or LVG and VGVI or VGVL. These peptides had not yet been described for amaranth protein nor are they present in known sequences of amaranth grain protein, except LVG, which can be found in amaranth α‑amylase. Their ability to inhibit the activity of HMG-CoA reductase was determined, and we found that the sequences GGV, IVG, and VGVL, significantly inhibited this enzyme, suggesting a possible hypocholesterolemic effect.
Objetivo - Avaliar a compreensão, condutas e as práticas da Equipe Multiprofissional da Atenção a Terapia Intensiva na ocorrência de diarreia em pacientes com dieta enteral. Método - Estudo transversal, prospectivo, realizado em um hospital terciário do estado de São Paulo, por meio de coleta de dados aplicado às equipes de enfermagem, nutrição e médica. Utilizou-se formulário impresso com quatorze perguntas, considerando: possíveis condutas em ocorrência de diarreia em pacientes com dieta enteral, compreensão de definição de diarreia, meios de orientações de condutas utilizados e possíveis dificuldades em ocorrência de diarreia. Resultados – Participaram da pesquisa 85 profissionais, em sua maioria técnicos de enfermagem, nutricionistas e enfermeiros. As alternativas "informo a equipe de enfermagem e aguardo a orientação da conduta" e “informo a equipe médica e aguardo a orientação da conduta” demostraram valores significativos (p=0,003 e p<0.001, respectivamente) e observa-se uma tendência por parte da equipe da enfermagem e da nutrição para “informo a equipe de nutrição e aguardo orientação da conduta” (p=0,056). Sobre o conhecimento do protocolo do hospital sobre ocorrência de diarreia em pacientes com dieta enteral, 73,33% dos nutricionistas relataram seu conhecimento (p=0,0018). A maioria dos profissionais pesquisados relataram não ter participado de dinâmica sobre o tema (p=0,028). Apesar dos dados promissores, evidencia-se a necessidade de dinâmicas e educação continuada sobre esta temática para os profissionais estudados.
Dedicoà minha querida avó, in memorian. 6 7 AGRADECIMENTOS A minha família, pelo apoio, auxílio e compreensão. Agradeço ao meu marido Tiago e filhos, Rafaela e Arthur pelo carinho e força. Aos meus pais e irmãos, pela ajuda e palavras de incentivo e descontração. Ao professor José Alfredo Gomes Arêas pelos anos de ensinamento, paciência e orientação. A banca examinadora, pelas sugestões dadas no momento da defesa: Elizabeth Aparecida Ferraz da Silva Torres, Daniel Carvalho Pimenta, Marilia Cerqueira Leite Seelaender e Marisa Passarelli. Ainda à professora Elizabeth Torres pela disponibilidade do Laboratório de Bromatologia e aos pesquisadores Daniel Pimenta e Valéria Nunes, pelo auxílio com análises e ao longo do trabalho.As Doutoras Geni e Liania, pelo suporte técnico nos laboratórios, e pelas conversas do dia-a-dia.As amigas e companheiras de laboratório Cíntia Silva, RosanaSoares e Bianka Caliman, pela amizade e cooperação técnica ao longo da jornada. As minhas coordenadoras, anteriores e atual, do Hospital do Servidor PúblicoMunicipal: Fabiana Gonçalves Ferreira, Flávia Ivana Pallinger e, principalmente, a Eunice Harumi S. Sakamoto, que permitiram a execução da pesquisa.As minhas amigas e colegas nutricionistas do HSPM, pela colaboração, apoio e risadas: Fukazawa e Ana Maria de Moraes. E secretárias, Mara, Tereza e Adelma pelo auxílio. Aos amigos e colegas de laboratório: Camila Olivieri, Gustavo Fontanari, Marcelo Marques, Nara Letícia Zandonadi e Marcela Figueira, por todo o carinho, colaboração e aprendizado compartilhado. E todos aqueles que contribuíram de alguma forma para o desenvolvimento do projeto. CARLOS-MENEZES, A.C.C.C. Effect of amaranth grain peptides (Amaranthus cruentus L.) on the mechanisms of absorption and synthesis of cholesterol. 2018. ABSTRACT Introduction: Cardiovascular diseases are an important cause of death worldwide and hypercholesterolemia is directly related as an aggravating factor of this morbidity. Diet plays an important role in this process and some foods such as amaranth, especially its protein, have shown ability to lower plasma cholesterol. Studies suggest that this effect is related to peptides formed during the digestion of their protein, which play an important role in the regulation and modulation of lipid metabolism. The hypocholesterolemic effects, already observed, indicate the use of amaranth protein as a bioactive compound aimed to promoting health. Considering that the hypocholesterolemic effects of these peptides are complex and there are several hypotheses formulated, it is important to carry out studies to evaluate the interaction of peptides in the intestinal absorption of cholesterol and its genetic modulation. Objectives: To verify the effects of amaranth grain flour hydrolyzate on cholesterol uptake and ABCA1, ABCG1, NPC1L1, AMPK, HMGR and SREBP-2 genes modulation in Caco-2 intestinal cells, and modulation of ABCG8, HMGR, SREBP-2 genes and AMPK in hamster intestinal cells. Methodology: Amaranth was crushed, the created flour was defatted and its protein ...
Ao professor José Alfredo Gomes Arêas por me conceder a oportunidade para desenvolver o trabalho de pesquisa. Às professoras Dra. Ursula M. Lanfer Marquez e Dra. Elizabeth Aparecida F. da Silva Torres, membros da banca examinadora, pelas contribuições durante a qualificação e pelas sugestões dadas para a finalização da dissertação. Ao meu marido, que sempre ao meu lado me compreendeu nos momentos de ausência e me apoiou incondicionalmente na continuidade deste trabalho. Aos meus pais que se sacrificaram e se empenharam pela minha formação, e sempre me incentivaram a buscar o melhor. Aos meus irmãos Marília, Fernanda e Pedro por estarem presentes quando precisei de auxílio acadêmico ou atenção para minha filha.
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