Key pointsr Cholesterol depletion increases reactive oxygen species (ROS) levels in extra-and intracellular space through NAPDH oxidase activation, which is accompanied by synaptic lipid oxidation.r ROS production due to extraction of cholesterol involves both an enhancement of synaptic vesicle exocytosis and an increase in cytosolic [Ca 2+ ] i . r The results help us better understand why a decrease of membrane cholesterol increases spontaneous synaptic vesicle exocytosis.Abstract Using electrophysiological and optical techniques, we studied the mechanisms by which cholesterol depletion stimulates spontaneous transmitter release by exocytosis at the frog neuromuscular junction. We found that methyl-β-cyclodextrin (MCD, 10 mM)-mediated exhaustion of cholesterol resulted in the enhancement of reactive oxygen species (ROS) production, which was prevented by the antioxidant N-acetyl cysteine (NAC) and the NADPH oxidase inhibitor apocynin. An increase in ROS levels occurred both extra-and intracellularly, and it was associated with lipid peroxidation in synaptic regions. Cholesterol depletion provoked a rise in the intracellular Ca 2+ concentration, which was diminished by NAC and transient receptor potential vanilloid (TRPV) channel blockers (ruthenium red and capsazepine). By contrast, the MCD-induced rise in [Ca 2+ ] i remained unaffected if Ca 2+ release from endoplasmic stores was blocked by TMB8 (8-(diethylamino)octyl-3,4,5-trimethoxybenzoate hydrochloride). The effects of cholesterol depletion on spontaneous release and exocytosis were significantly reduced by the antioxidant, intracellular Ca 2+ chelation with BAPTA-AM and blockers of TRPV channels. Bath application of the calcineurin antagonist cyclosporine A blocked MCD-induced enhancement of spontaneous release/exocytosis, whereas okadaic acid, an inhibitor of phosphatases PP1 and PP2A, had no effect. Thus, our findings indicate that enhancement of spontaneous exocytosis induced by cholesterol depletion may depend on ROS generation, leading to an influx of Ca 2+ via TRPV channels and, subsequently, activation of calcineurin.

No abstract

No abstract

Анализ данных литературы свидетельствует о чрезвычайной актуальности проблемы бесплодия в современных демографических условиях и напряженной эпидемиологической ситуации по туберкулезу. В настоящее время генитальный туберкулез (ГТ) является причиной женского бесплодия в 10-27,8% случаев и признан серьезной медико-социальной проблемой по причине развития у женщин репродуктивного возраста (24-35 лет). Вопросы диагностики ГТ представляют сложную проблему: отсутствуют общепринятые схемы ведения пациенток с бесплодием для своевременного выявления заболевания; клинические проявления неспецифичны; отмечена недостаточная чувствительность молекулярно-генетического, морфологического, микробиологических методов в диагностике; результаты применения гистеросальпингографии противоречивы (40-60% расхождений, высокий риск осложнений); имеются ограничения показаний к пробе Коха и тест-терапии; дискутируется применение лапароскопии; неоднородность эндоскопической картины позволяет заподозрить ГТ в 13-59,7% случаев, а верифицировать при этом диагноз-в 9-26,3%. Иммунологические методы, в частности серологические, получили приоритет для диагностики внелегочного туберкулеза. Исследование показателей местного гуморального иммунитета у женщин с бесплодием наряду с оценкой эндоскопических особенностей, как показано в приоритетных исследованиях, позволит ускорить диагностику ГТ и избежать необратимых изменений репродуктивной системы. Ключевые слова Бесплодие, туберкулез гениталий, диагностика, методы.

No abstract