A espécie bubalina possui característica peculiares, como a dificuldade de identificação de estro, somada a determinação do melhor momento para a realização da IA e escassez de sêmen congelado de búfalo no mercado nacional, tornando a implementação e utilização desta biotecnia mais laboriosa. Objetivo: Comparar a eficiência do uso do sêmen refrigerado versus congelado sobre a taxa de concepção em búfalas submetidas a inseminação artificial em tempo fixo (IATF - Ovsynch) nos meses de maio a junho. Métodos: Foram utilizados os ejaculados de 2 touros Murrah obtidos por coleta com vagina artificial; as amostras de sêmen foram fracionadas em 2 alíquotas; uma diluída em extensor comercial Botu-Bov® para a refrigeração (BB-R, grupo refrigerado) e uma diluída no mesmo extensor o para congelamento (BB-C, grupo congelado). As amostras foram refrigeradas a 5 °C/24 horas em uma taxa de 0,25 oC/minuto e mantidas nesta temperatura por 24 horas grupo BB-R e após quatro horas de equilíbrio as amostras BB-C foram congeladas a 5 cm da superfície de nitrogênio líquido. A partir de 30 dias pós-parto, 90 búfalas foram submetidas ao seguinte esquema de sincronização em dia aleatório do ciclo estral: D0 (14:00h), aplicação de 20 µg i.m de GnRH (Cystorelin®, Merial; USA), no D7 (14:00h) 0,530 mg i.m. de PGF2α (Croniben®, Biogênesis - Bagó, BA, Argentina); no D9 (14:00h) 20 µg i.m de GnRH (Cystorelin®) e no D10 (6:00h da manhã) foi realizada a IA. As variáveis consideradas foram escore de condição corporal (ECC), dias pós-parto (DPP), diâmetro folicular (DF) na hora da IA, presença ou ausência de muco genital (MG) e touro. A ultrassonografia (Aloka-SSD 500, probe de 5 MHz, Tokyo, Japan), foi realizada 30 dias após a IA. Resultados: A taxa de concepção total foi de 44,4%, sendo observado diferença significativa (p<0,05) para as variáveis tipo de sêmen (SR = 57,8 e SC = 31,1%). Já para as variáveis totais DPP; DF; MG e touros não houve diferença estatística entre os tipos de sêmen (p>0,05), obtendo-se 41,7, 48,3 e 43,2%; 45,0 e 44,2%; 44,3 e 45,0%; 45,5 e 43,9%, respectivamente. Conclusão: O SR apresentou 2,5 vezes mais chance de concepção comparado ao SC quando utilizado em protocolos Ovsynch.