Впервые показана способность секрета слюнных клеток (ССК) медицинской пиявки продуцировать оксид азота в культуре эндотелия человека (HUVEC) и в кардиомиоцитах крысы (КМК) при непосредственном его определении с помощью нового NO-специфичного реагента -комплекса двухвалентной меди с производным флуоресцеина (Cu-FL). NO детектировали в клетках методом флуоресцентной микроскопии и определяли количественно в клетках и в культуральной жидкости методом флуоресценции. Стимулированная ССК интенсивность синтеза NO в клетках HUVEC, но не в КМК, такова, что оксид азота выходит в межклеточное пространство и это обеспечивает их дальнейшее распространение. Представлена локализация центров синтеза NO в клетках и показано, что увеличение количества NO при действии ССК на HUVEC и на КМК происходит в результате увеличения активности eNOS/nNOS, но не iNOS. В эндотелиальных клетках в присутствии ССК активируются процессы нитрозилирования, что проявляется в увеличении количества нитрит-ионов в среде культивирования по отношению к количеству NO. Поэтому важно, особенно в течение первого часа наблюдения за синтезом NO, использовать Cu-FL, но не реактив Грисса. NO-зависимый механизм действия ССК, возможно, является одним из факторов, обеспечивающих его положительное действие при гирудотерапии.Ключевые слова: оксид азота, секрет слюнных клеток медицинской пиявки, NO-зонд Cu-FL, флуоресцентная микроскопия, трансмиссионная электронная микроскопия, реактив Грисса, NO-синтазы.ВВЕДЕНИЕ. В последние годы активно развивается гирудотерапия -метод лечения самых разных заболеваний путём постановки медицинских пиявок на определённые зоны кожного покрова пациента. Этот древний метод прекрасно зарекомендовал себя как самодостаточный при терапии различных патологий, в том числе и сердечно-сосудистых [1,2]. Гуморальным агентом гирудотерапии является секрет слюнных клеток (ССК), диссименированных среди мышечной ткани в головной области медицинской пиявки. Через клеточные протоки секрет изливается в ранку на кожном покрове, нанесенную укусом медицинской пиявки. Методом двумерного электрофореза обнаружено присутствие в составе CCК более 100 белков с молекулярной массой 10-97 кДа в интервале рН 4,1-8,2 [3]; c помощью микрохромато-масс-спектрометрии в составе CCК обнаружено 65 * -адресат для переписки

The effects of components of the salivary gland secretion (proteases and protease inhibitors) of the medicinal leech (Hirudo medicinalis) on the growth of neurites of sensory neurons from chick embryos (10-11 days old) were studied in organotypic cultures. Destabilase and high-molecular-weight bdellin B, (0.01, 0.02, 0.05, and 0.1 ng/ml), bdellastasin (0.02 and 0.05 ng/ml), and eglin C (0.1 ng/ml) had neurite-stimulating effects on day 3 of cultivation of spinal ganglia. Identification of the neurite-stimulating activity of these components of medicinal leech salivary gland secretions creates the basis for creating new therapeutic agents for the treatment of neurodegenerative diseases.