The catalytic domain of 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase isoforin 1 (HMGRI cd) from Aruhidopsis thulium has been expressed in Escherichiu coli in a catalytically active form and purified. The high efficiency of the bacterial expression system together with the simplicity of the purification procedure used in this study resulted in the attainment of large quantities of pure enzyme (about 5 mg/l culture) with a final specific activity of up to 17 U/mg. This specific activity is higher than that reported to date for any 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase (HMGR) purified from a plant source.HMGRlcd activity was completely blocked by the HMGR inhibitor mevinolin (IC5,, = 12.5 nM). No significant differences were observed between the K,,, values of HMGRlcd for NADPH (71 2 7 pM) and (S)-.?-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA (8.3 -t 1 ..5 pM) and those of pure HMGR preparations obtained from different plant sources. The purified HMGRl cd was reversibly inactivated by phosphorylation at a single site by Bmssica olrmcru HMGR kinase A, which is functionally related to the mammalian AMP-activated protein kinase. The site of phosphorylation is Ser.577 in the complete sequence of A. tlzulinntr HMGRI. The results in this paper represent the first evidence that a higher plant HMGR is regulated by direct phosphorylation, at least in a cell-free system. Our results also reinforce the view that the AMPactivated protein kinase/SNF1 family is an ancient and highly conserved protein kinase system.
Pese a que educadores en ciencia reconocen a la historia de la ciencia (HOS) como un elemento importante para la enseñanza de la ciencia y de la naturaleza de la ciencia (NOS), los profesores no parecen reconocer el valor que posee la HOS, ni disponen de materiales para incorporarla en sus aulas. En este trabajo se revisa el papel que juega la HOS en la enseñanza de la ciencia, como un elemento motivador para la enseñanza de contenidos conceptuales, para fomentar el espíritu crítico, para invitar a los estudiantes a hacerse preguntas, para identificar sus obstáculos conceptuales y para la enseñanza de NOS. Se analizarán los distintos elementos históricos que se han propuesto para incluir en las estrategias didácticas, donde destacan los errores científicos, experimentos clásicos, disputas, desarrollo de teorías, entre otros. En cuanto a los enfoques de enseñanza para incorporar la HOS en la clase de ciencia, se revisan tanto modelos implícitos (Monk y Osborne, 1997), como explícitos (Paraskevopoulou & Koliopoulos, 2010, Rudge y Howe (2009). Para ejemplificar tanto elementos históricos usados como modelos de enseñanza de la HOS, se expone una propuesta para la enseñanza de la genética, considerando el desarrollo histórico de la teoría de la herencia para enseñar algunos conceptos científicos y algunos aspectos de NOS. Luego de realizar una revisión de los programas de estudio vigentes en Chile se evidencia la mención recurrente de elementos de la HOS, pero sin mayores propuestas didácticas para su incorporación en las clases. Finalmente se discuten las implicancias y desafíos del uso de HOS para la enseñanza de las ciencias y la formación inicial y continua.
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