RESUMENEl estudio tuvo por objetivo evaluar el efecto de tres crioprotectores: Dimetil Sulfóxido (DMSO), Etilenglicol (EG) y Glicerol (GL) sobre la criopreservación de espermatozoides epididimarios de alpaca. Se trabajó con testículos de alpacas mayores de tres años. Se separaron los epidídimos y se diseccionaron las colas. Los espermatozoides fueron recuperados con la fracción A del dilutor (leche descremada, yema de huevo y fructosa) y se emplearon las muestras con motilidad espermática igual o mayor a 50% (n=18, motilidad = 69%, integridad funcional de membrana espermática = 48%). La fracción A con los espermatozoides fue refrigerada (1 ºC/5 min) hasta alcanzar 5 ºC. Esta fracción se dividió en tres y se añadió un volumen igual de la fracción B conteniendo un crioprotector (DMSO: 7%, 0.9M; EG: 7%, 0.9M; GL: 7%, 1.2M). Se llenaron pajillas de 0.5 ml con la dilución final y se congelaron en nitrógeno líquido. Después de 7 días de almacenamiento, las motilidades posdescongelación fueron de 31, 8 y 24% y los porcentajes de integridad funcional de la membrana espermática fueron de 28, 17 y 26% para DMSO, EG y GL, respectivamente. Se llevó a cabo un ensayo de fecundación in vitro con los espermatozoides descongelados de los grupos DMSO y GL, donde la tasa de división a las 72 h posfecundación fue de 47 y 27%, respectivamente, sin diferencias significativas. Los resultados sugieren que el dimetil sulfóxido y el glicerol son agentes crioprotectores más efectivos en comparación al etilenglicol.

Interleukin-6 (IL-6) is a pleiotropic cytokine that regulates the immune response, acute-phase reaction, and hematopoiesis. As a first step in studying the actions of IL-6 in pigs, the regulation of IL-6 expression was examined in various swine cells, including a fibroblast cell line, peripheral blood mononuclear cells (PBMC), and alveolar macrophages. IL-6 expression in transformed swine testicular (TST) fibroblasts was enhanced by TNF and IL-1 beta and to a lesser extent by poly(I).(C) and LPS. IL-6 was induced in porcine PBMC by either LPS or PHA; however, the combination of LPS plus PHA resulted in maximal IL-6 expression. Furthermore, in PBMC cells separated by adherence, LPS was a more potent inducer than PHA in adherent cells, whereas PHA was more potent in nonadherent cells. Alveolar macrophages collected from different pigs could be divided into low and high responders with respect to IL-6 induction by LPS. IL-6 mRNA induction by LPS could be detected in only 6 of 20 donor animals. Other inflammatory cytokines (IL-8, IL-beta, and TNF) were readily induced by LPS in alveolar macrophages from both low and high responders. Treatment of low-responder alveolar macrophages with conditioned medium containing IFN-gamma did not significantly alter the capacity of these macrophages to synthesize IL-6 mRNA in response to LPS. Comparison of IL-6 production capacity by the cell types in this study revealed the following order: PBMC = high-responder alveolar macrophages >> TST.cells > low-responder alveolar macrophages. Thus, PBMC appear to be quantitatively the most significant source of IL-6 in swine on a per cell basis.

RESUMENSe evaluó el efecto de la temperatura (12-15 y 22-25 ºC) y el tiempo de almacenamiento (0 y 16 horas) de ovarios de alpacas sobre la tasa de maduración y división posfecundación in vitro. Los ovarios fueron recolectados de alpacas adultas sacrificadas en el camal de Pilpichaca (Huancavelica, Perú) y transportados al laboratorio en solución salina al 0.9% con una temperatura inicial de 35 ºC. Los ovarios fueron distribuidos al azar en los tratamientos Control (0 h), T1 (16 h a 12-15 ºC) y T2 (16 h a 22-25 ºC). Los ovocitos se obtuvieron por disección, seleccionándose aquellos con una o más capas de cúmulos, y madurados en medio TCM 199 por 40 h bajo condiciones de 5% CO 2 y 39 °C. Parte de los ovocitos (172) fueron fijados y teñidos para evaluar el estadio de maduración nuclear y los restantes (440) fueron co-cultivados por 18 h con espermatozoides obtenidos de epidídimos. Posteriormente, los presuntos cigotos fueron colocados en medio de cultivo KSOM por 72 h posfecundación in vitro y luego transferidos a medio SOF. Se obtuvo una tasa de maduración nuclear en metafase II de 47.9, 12.2 y 32.7%, una tasa de división de 46.2, 8.1 y 32.7% y una tasa de blastocistos de 33.3, 14.2 y 20.6% para los grupos Control, T1 y T2, respectivamente (p<0.05, excepto entre la tasa de blastocistos del T1 y T2). Los resultados sugieren que el almacenamiento de ovarios de alpaca a 22-25 ºC por 16 h (T2) permite mantener la calidad de los ovocitos y obtener una mayor tasa de maduración y de división posfecundación in vitro.Palabras clave: temperatura, almacenamiento de ovarios, ovocitos, fecundación in vitro, alpacas