Background
The ewe lamb nutritional and physiological state interfere with the ovarian environment and fertility. The lack or excess of circulating nutrients reaching the ovary can change its gene expression. A protein deficiency in the blood caused by an Haemonchus contortus abomasal infection is detrimental to the organism’s development during puberty. The peripubertal period is a time of intensive growth that requires a high level of nutrients. An essential feature controlling pubertal arousal and female reproductive potential is ovarian follicle growth activation. Protein supplementation improves the sheep’s immune response to helminthic infections. We aimed to determine if supplementing protein in infected ewe lambs’ diet would impact the ovarian environment leading to earlier ovarian follicle activation than in infected not supplemented animals.
Methods
We fed 18 Santa Ines ewe lambs (Ovis aries) - bred by the same ram - with either 12% protein (Control groups) or 19% protein (Supplemented groups) in their diets. After 35 days of the diet, they were each artificially infected or not with 10,000 Haemonchus contortus L3 larvae. Following 77 days of the diet and 42 days of infection, we surgically collected their left ovaries and examined their genes expression through RNA sequencing.
Results
We found that protein supplementation in infected animals led to an up-regulation of genes (FDR p-values < 0.05) and biological processes (p-value cut-off = 0.01) linked to meiotic activation in pre-ovulatory follicles and primordial follicle activation, among others. The supplemented not infected animals also up-regulated genes and processes linked to meiosis and others, such as circadian behaviour. The not supplemented animals had these same processes down-regulated while up-regulated processes related to tissue morphogenesis, inflammation and immune response.
Conclusion
Diet’s protein supplementation of peripubertal infected animals allowed them to express genes related to a more mature ovarian follicle stage than their half-sisters that were not supplemented. These results could be modelling potential effects of the interaction between environmental factors, nutrition and infection on reproductive health. When ovarian activation is achieved in a timely fashion, the ewe may generate more lambs during its reproductive life, increasing sheep breeders’ productivity.
À todos os estudantes e cientistas, por sua coragem, força e resiliência.
Dedico
AGRADECIMENTOSÀ Universidade de São Paulo por proporcionar a estrutura necessária para a realização deste trabalho.Ao Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA) pela oportunidade de dar minha contribuição à ciência.À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (processo Fapesp 2017/18086-0) pela bolsa de doutorado que proporcionou minha moradia e subsistência na cidade de Piracicaba.À CAPES (Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior) -Código de Financiamento 001, por três bolsas de estudo no início do doutorado.Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) pelo financiamento deste projeto (Processo N. 420373/2016-0). Aos meus amados pais, José Vilemar e Orminda, por sua garra e determinação em me proporcionar boa educação, que aceitam todos os meus objetivos de bom grado e rezam pelo meu sucesso, me apoiam e incentivam incansavelmente.Ao meu orientador Prof. Dr. Helder Louvandini pela oportunidade de trabalhar em sua equipe, pela paciência, por todos os ensinamentos e pela inestimável orientação ao longo do trabalho que contribuíram para meu crescimento profissional e aprendizado ético e científico.Ao meu coorientador Prof. Dr. Alessandro Francisco Talamini do Amarante pela atenção, afabilidade, por toda a inestimável colaboração ao trabalho e por seus ímpares ensinamentos em parasitologia. Ao Prof. Dr. Adibe Luiz Abdalla, pelo apoio, pela generosidade e colaboração em todo o trabalho e por todos os ensinamentos. À Profª. Drª. Tsai Sui Mui por sua atenção e toda a colaboração para a realização deste trabalho. Assim como ao Laboratório de Biologia Celular e Molecular por fornecer estrutura e uso de equipamentos para extrações de RNA, e aos técnicos Fábio e Vagner por toda a atenção. À Dra. Patrícia Louvandini por seus ensinamentos nas técnicas genômicas, sempre tão afável e com tanta atenção. À Profª. Drª. Luciana Morita Katiki do Instituto de Zootecnia (Nova Odessa) por todo o apoio, ensinamentos e pela generosidade e gentileza na doação de larvas de Haemonchus contortus para o experimento. Ao Dr. Ricardo Lopes Dias da Costa, querido orientador do mestrado, que não somente fez a ponte para eu chegar ao doutorado, mas continua a ser uma fonte de ensinamentos e um porto seguro de seus ex-alunos.
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