This work presents a procedure to perform nuclear halos, nuclear matrix with the associated DNA loops, from Drosophila salivary gland polytene nucleus. The purification with hypo-osmotic buffers in the absence of polyamines, as spermine and spermidine, whose function seems to be related to the chromatin compaction, was considered essential. The non-compacted polytene chromosome in the giant nucleus could be used for protein extraction that allows the liberation of the loops. The profile of the DNA matrix and loop fractions, left after nuclear halo digestion with restriction enzyme, confirms the relationship between these fractions suitable for functional analysis. This procedure could be important to obtain a direct relationship between nuclear matrix association and transcription process in the interphase polytene chromosomes of Drosophila salivary gland nucleus.
A protocol for recovered nuclear halos from insect polytene nuclei after the extraction of the nuclear proteins using LIS detergent is reported in this work. Analysis was carried out using fluorescence and confocal laser scan microscopy. The extraction of nuclear halos was possible only with nuclei-fraction isolation in hypotonic buffer without spermine and spermidine. The recovered nuclear halos from Bradysia hygida salivary gland polytene nuclei, contributed greatly to the study of the structure and function of these special organelles.
Observações à microscopia eletrônica e estudos bioquímicos de cromossomos e núcleos sem histonas tem suportado a hipótese que o DNA de eucariotos é organizado em alças associadas com o esqueleto cromossômico ou à matriz nuclear. A observação da matriz nuclear sem a remoção do DNA, através da digestão com enzimas de restrição, apresenta uma figura em halo que representa a liberação das alças de DNA. Um protocolo para a obtenção de halos nucleares de núcleos politênicos de insetos, através da extração de proteínas usando o detergente LIS, é reportado nesse trabalho. Foram realizadas análises utilizando-se microscopia de fluorescência e microscopia de varredura confocal a laser. A extração de halos nucleares foi possível somente com o isolamento da fração nuclear em tampão sem espermina e espermidina. A obtenção de halos nucleares de núcleos politênicos de glândula salivar de Bradysia hygida contribui significativamente para o estudo da estrutura e função dessas organelas tão especiais
Atualmente, é generalizada a presença de animais de estimação em casas e apartamentos, animais que muitas vezes são retratados como parte da família. Há também pessoas de diferentes idades que já visitaram um zoológico. No entanto, não há conjecturas quanto aos reais motivos para esses animais serem privados de liberdade, independentemente do ambiente em que se encontrem. Por meio da temática social das condições de vida dos animais, foi proposta uma investigação com alunos de uma turma de 2º ano do ensino médio sobre animais em cativeiro, vida selvagem e situação doméstica. A investigação foi realizada na abordagem Ciência, Tecnologia e Sociedade (CTS) dentro do Programa Institucional de Bolsas de Iniciação à Docência (PIBID), subprojeto Biologia. Por meio de perguntas instigantes e uma charge crítica, os alunos foram recomendados a descrever suas convicções. As respostas descritas pelos alunos foram ponderadas pela Análise de Conteúdo, estabelecendo categorias e agrupando as respostas quando semelhantes e com ideais semelhantes. Foram observadas compreensões expressivas de caráter antropocêntrico, em que os animais são percebidos como uma forma de suprir as necessidades humanas. Houve também situações de empatia com animais em espaços restritos. Assim, percebe-se que há muito a ser repensado sobre a relação entre o ser humano e os outros animais, independentemente de suas condições de vida, buscando desconstruir as convicções antropocêntricas da sociedade.
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