Introducción: la resistencia a los antimicrobianos es un problema de salud pública cuyo tratamiento puede ser difícil y costoso. Objetivo: analizar el fenotipo de resistencia antimicrobiana en bacterias aisladas en hospitales y clínicas del departamento del Cesar (Colombia) durante 2014. Materiales y métodos: se realizó un estudio descriptivo en cinco laboratorios clínicos del departamento. Se utilizó el software Whonet 5.6 para el análisis de datos y se reportaron los perfiles de resistencia. Resultados: las principales bacterias Gram negativas aisladas en la Unidad de Cuidados Intensivos fueron Klebsiella pneumoniae (18,8%), Pseudomonas aeruginosa (15,0%) y Escherichia coli (13,8%). En los demás servicios predominaron Escherichia coli (36,4%) y Staphylococcus aureus (15,5%). En la Unidad de Cuidados Intensivos la mayor resistencia fue a la ampicilina-sulbactam y las cefalosporinas de tercera y cuarta generación en los aislados de Klebsiella pneumoniae (46,2%, 28,3% y 29,1%, respectivamente) y de Escherichia coli (21,8%, 21,8% y 23,0%, respectivamente). En los aislados de Acinetobacter la resistencia fue mayor que en los de Pseudomonas aeruginosa, con predominio a la ceftriaxona y la cefepima (51,1%) en los aislados de la Unidad de Cuidados Intensivos. En los aislamientos de Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis se observó resistencia a la oxacilina en el 61,0% y 81,8% de los provenientes de la Unidad de Cuidados Intensivos, y en el 48,7% y el 89,7% de las demás unidades, respectivamente. Conclusiones: se observaron altas frecuencias de resistencia antibiótica por lo que reforzar la vigilancia epidemiológica a nivel local permitirá disminuir la resistencia bacteriana en los ambientes intrahospitalarios.