O Parque Estadual Serra da Boa Esperança (PESBE) foi criado em 2007 e encontra-se na área ecotonal de Cerrado e Mata Atlântica, dois hotspots de conservação mundial. Localizado na região sul do estado de Minas Gerais e às margens da hidrelétrica de Furnas, a Serra da Boa Esperança é considerada como um Patrimônio Natural. Estudos vêm sendo desenvolvidos no parque e este é o primeiro sobre a mastofauna de médio e grande porte, o que trará maior conhecimento sobre as espécies em unidades de conservação de Minas Gerais e auxiliará no preenchimento de lacunas sobre a riqueza de regiões ecotonais. Este estudo objetivou inventariar a mastofauna de médio e grande porte do PESBE e parte de seu entorno. Os métodos de coleta incluíram armadilhas fotográficas, busca de vestígios, avistamentos e relatos de funcionários em que foram amostradas 29 localidades. Foi criada uma curva do coletor e de riqueza estimada pelo estimador Jackknife de 1a ordem. Foram registradas 16 espécies nativas e três exóticas, representando 71% da riqueza estimada, incluindo exóticas. A composição de mamíferos mostra espécies relevantes e ameaçadas de extinção como mesopredadores e predadores de topo de cadeia. A baixa quantidade de Unidades de Conservação e outras áreas naturais em conectividade com o PESBE e a alta fragmentação tornam a área um local de refúgio para a mastofauna.