The dry mass of individual vaccinia virions, as an example of a presumably uniform biological population, prepared in different lost at the Institute for Tropical Hygiene in Hamburg, was tested for variability by quantitative electron microscopy. A value of 5.26 X 10(-15) g for the median weight of the particle was calculated from 7,300 determinations. By assessing the variability of polystyrene latex spheres, which were used as mass standards, we demonstrated that the variability of dry mass of vaccinia virions is fivefold greater than the variability (standard) introduced by the method for determining mass. It was concluded that while genetic control in a presumably homozygous virion is strict with respect to quality, quantity of viral components (other than DNA) varies in fashion that can be aptly described by a log-normal distribution. It is recognized that this observation is empirically supported by the paradigm that any composite biological entity is subject to quantitative variability, the more so the heavier the individual representatives of a species are. In addition, the effects that extractions and staining have on the dry mass of vaccinia are reported, as well as is the median for the dry mass of other strains of pox viruses.
Das Fehlen ausgeprägt substratspezifischer Abbaumethoden setzte bisher der Elektronenmikroskopie biologischer Objekte recht enge Grenzen. Die Anwendung der durch hohe Selektivität ausgezeichneten Nucleasen, die lichtoptisch in steigendem Maße zu guten Erfolgen führen, war elektronenoptisch nicht von Nutzen, da nach Depolymerisation der Nucleinsäuren die massenmäßig überwiegenden Proteinanteile der Nucleoproteide liegen bleiben. Wird die „Schutzwirkung“ der Nucleinsäuren gegenüber peptischer Hydrolyse jedoch durch vorherige Einwirkung einer Nuclease aufgehoben, so kann das ursprünglich nicht wirksame Pepsin bei nachfolgender Anwendung proteolytisch wirken. Die Proteolyse läuft im Rahmen der durch die Nucleasewirkung vorgegebenen Spezifität ab, so daß eine selektive Aufhellung entsprechender Strukturen resultiert.An Chabaud-fixierten Keimen von Escherichia coli aus der log-Phase ließen sich durch Kombination von Ribonuclease und Pepsin die Kerne, nach weiterer Behandlung mit Desoxyribonuclease und Pepsin völlig leere Membranen darstellen. Parallelversuche mit Giemsa- und Lichtgrünfärbung sowie mit dem Phasenkontrastverfahren zeigten, daß die elektronenoptischen Ergebnisse mit den lichtoptisch bereits gesicherten korrespondieren. Auf die Bedeutung der Wahl des Fixierungsmittels bei derartigen Untersuchungen wird hingewiesen.
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