To study the dissemination of Mycobacterium bovis subsp. caprae, 79 European isolates from cattle, humans, and other hosts were examined by spoligotyping and IS6110 restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis. Among a total of 11 different spoligotypes identified, type C1 proved to be predominant (n ؍ 62). Five of the spoligotypes are described for the first time. A total of 43 different RFLP types were identified, thus allowing further differentiation for epidemiological tracking. Isolates from a series of outbreaks in one village proved to be of the same spoligotype and of identical or closely related RFLP types. Mycobacterium bovis subsp. caprae is a member of the M. tuberculosis complex, which also includes M. tuberculosis, M. africanum, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, and M. canettii.General interest in this pathogen, which was isolated from tuberculous lesions in humans, cattle, goats, sheep, and deer, has been steadily increasing since its first description (3). Thus, the prevalence of M. bovis subsp. caprae was extensively studied in Spain (4, 7) and France (8). There have been several reports about its occurrence in animals and humans in Austria (18) and the Czech Republic (15,16,17) and also in Germany (13), where it is reported to account for about one-third of human M. bovis-associated cases of tuberculosis (10).Identification of the various M. tuberculosis complex organisms by spoligotyping (9, 12) is performed on the basis of the presence or absence of certain combinations of 43 spacers which are interspersed among a high number of conserved repeats in the chromosomal direct-repeat region. Additional intraspecies genetic differences can be revealed by IS6110 fingerprinting or IS6110 restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis (19), which takes advantage of the mobility of insertion element IS6110 along the mycobacterial chromosome.The combination of spoligotyping and IS6100 RFLP can be expected to improve the possibilities of revealing epidemiological relationships because of the different discriminatory potential of both methods (18). Recent studies of serial isolates of M. tuberculosis clearly showed that due to the relatively frequent occurrence of IS6110 transposition events, IS6100 RFLP patterns were more likely to change within a few years of a strain's appearance than spoligotyping patterns (1,6,20).
Zusammenfassung Es wird über Versuche berichtet, Aflatoxin B1‐vortäuschende Stoffe, die bei der Anwendung der Extraktionsmethode nach Pons et al. (1966) bei anschließender dünnschichtchromatographischer Auftrennung den Aflatoxin B1‐Nachweis stören können, auf physikalisch‐chemischem Wege zu eliminieren. Dabei wurde auch versucht, die Aussagekraft der DC‐Verfahren durch die zusätzliche Anwendung biologischer Tests zu erhöhen. Es gelang, die Interferenz des Antioxydans Ethoxyquin mit Aflatoxin B1 dünnschichtchromatographisch durch die Wahl geeigneter Fließmittelsysteme (insbesondere von Toluol‐Äthylacetat‐90%ige Ameisensäure, 5:4:1) auszuschalten, jedoch nicht bei Verwendung des säulenchromatographischen Verfahrens, wie es von Ranfft (1974) beschrieben worden ist. Desweiteren wurde nachgewiesen, daß Ethoxyquin die Erpebnisse biologischer Verfahren auf Grund eventueller Toxizitat unbeeinflußt läßt. Im Falle eines Aflatoxins B1‐vortäuschenden neuen Stoffwechselproduktes von Aspergillus flavus Link war die Eliminierung der Interferenz nur mit Hilfe zusätzlicher biologischer Tests möglich. Dabei führte jedoch erst die vergleichende Anwendung von mehreren Methoden zu einem diagnostisch verwertbaren Ergebnis. Summary Detection of aflatoxins in the presence of interfering substances 2. Studies on elimination of substances that interfere with thin layer chromatography determination of aflatoxin B1 Studies are reported on elimination by physico‐chemical methods of substances that interfere with the thin layer chromatographic determination of aflatoxin B1. Attempts were also made to improve the value of the chromatographic methods by using supplementary biological tests. It proved possible to exclude the interference caused by the antioxidant Ethoxyquin by choosing a suitable elution system (especially toluol‐ethyl acetate‐90% formic acid, 5:4:1). The same could not be achieved with column chromatography as described by Ranfft (1974). It was also shown that Ethoxyquin is not affected by the use of biological techniques because of its toxicity. In the case of interference caused by a new metabolic product of Aspergillus ffavus Link this can only be effected by using supplementary biological tests. Only the use of several methods of determination of aflatoxins can provide satisfactory diagnostic results. Résumé Mise en évidence d'aflatoxines en présence de substances interférentes Communication II: Essai d'élimination des substances s'interférand avec l'aflatoxine B1 en chromatographie sur couche mince On rapporte les essais d'élimination de substances s'interférant avec l'aflatoxine B1 par un procédé physico‐chimique lors de la séparation finale en chromatographie sur couche mince selon la méthode d'extraction de Pons et al. (1966). On a recherché conjointement á augmenter l'efficacité du procédé de la chromatographie sur couche mince par l'emploi de tests biologiques supplémentaires. On a réussi á éliminer l'interférence de l'antioxydant éthoxyquine avec I'aflatoxine B1 en chromatographie sur couche mince par le choix d'un s...
Zusammenfassung Durch die Verabreichung eines mit Fusarium moniliforme Sheldon kontarninierten Geflügelmast‐Alleinfuttermittels, das bereits unter Praxisbedin‐gungen einschlägige Krankheitserscheinungen hervorgerufen hatte, konnte im Experiment bei Broilern, beginnend im Lebensalter von 20 Tagen, eine sich rasch entwickelnde hochgradige Rachitis mit Verbreiterung der Wachstumsplatten, unzulänglichem Aufbau des Knorpels, Entmineralisierung von Spongiosa und Kompakta, Ausbildung von Fasermark, teilweise mit granulomartiger Vermehrung von Osteoklasten ausgelöst werden. Durch Gaben von Kalzium bzw. Phosphor war das pathologische Bild nicht, durch Vitamin‐D3‐Applikation jedoch — besonders in Gelatine stabilisierter Form — rasch und günstig zu beeinflussen. Bei Versuchen mit physikalisch‐chemischen Verfahren im Schadfutter bekannte Toxine der Fusarien nachzuweisen, schlugen bislang fehl. Lediglich bei Anwendung biologischer Verfahren lieferten diese einen Hinweis auf das Vorkommen toxischer Metaboliten von Fusarien im Futtermittel und eine Bestätigung der Befähigung des Stammes zur Toxinbildung. Ein Vorhandensein von gelegentlich in Futtermitteln anzutreffender Mykotoxine von Aspergillen und Penicillien konnte durch Dünnschichtchromatographie ausgeschlossen werden. Die histologischen Veränderungen und die Pathogenese werden diskutiert. Es wird dabei in Betracht gezogen, daß der Pilz nicht nur durch die Bildung spezieller Toxine, sondern gegebenenfalls auch durch die Veränderung des Sterangrundkörpers des Vitamins D dessen Verfügbarkeit zu beeinträchtigen vermag. Summary Rickets in broilers by food contamination with Fusarium moniliforme Sheldon 2. Histological and mycotoxicological studies Feeding a broiler general feed contaminated with Fusarium moniliforme Sheldon which had produced the typical signs of the disease under practice conditions, in an experiment with broilers, starting when they were 20 days old, resulted in a rapidly developing severe rickets with widening of the growth plates, insufficient cartilage formation, demineralisation of the spongiosa and compacta and production of fibrous bone marrow with some degree of granulomatous proliferation of osteoclasts. Administration of Ca or P did not affect the pathological picture whereas giving vitamin D3 — especially in the gelatine‐stabilised form — had a rapid favourable effect. Attempts to demonstrate the known Fusarium toxins in the damaged food by physicochemical methods failed. The use of biological procedures finally demonstrated the presence of toxic metabolites of Fusarium in the feed and confirmed the ability of the strain to produce toxins. The presence in the feed of mycotoxins of Aspergillus and Penicillium was excluded by using thin‐layer chromatography. The histological and pathological changes are discussed. In this connection it is suggested also that the fungus not only produces specific toxins but also caused changes in the basic steroid structure of vitamin D which influence its availability. Résumé Rachitisme chez des poulets d'engrais apr...
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