Neem tree (Azadirachta indica) cell suspension culture is an alternative for the production of limonoids for insect control that overcomes limitations related to the supply of neem seeds. To establish conditions for cell growth and azadiracthin-related limonoid production, the effect of different sucrose concentrations, nitrate and phosphate in Murashige and Skoog (MS) medium, and the addition of one precursor and three elicitors was evaluated in shake flasks. The process was scaled up to a 3-l stirred tank bioreactor in one- and two-stage batch cultivation. In shake flasks, more than fivefold increase in the production of limonoids with the modified MS medium was observed (increase from 0.77 to 4.52 mg limonoids/g dry cell weight, DCW), while an increase of more than fourfold was achieved by adding the elicitors chitosan, salicylic acid, and jasmonic acid together (increase from 1.03 to 4.32 mg limonoids/g DCW). In the bioreactor, the volumetric production of limonoids was increased more than threefold with a two-stage culture in day 18 (13.82 mg limonoids/l in control single-stage process and 41.44 mg/l in two-stage process). The cultivation and operating mode of the bioreactor reported in this study may be adapted and used in optimization and process plant development for production of insect antifeedant limonoids with A. indica cell suspension cultures.
La fibra de la palma de iraca es usada como materia prima en la elaboración de múltiples artesanías incluyendo el sombrero de Panamá, razón por la cual es importante estudiar factores que contribuyan a la germinabilidad de las semillas, útiles en su propagación. El objetivo de esta investigación fue evaluar la capacidad de germinación de las semillas en condiciones in vitro y ex vitro procedentes de dos estadios de madurez de infrutescencias de Carludovica palmata. Los porcentajes de germinación se evaluaron mediante cuatro protocolos de desinfección, dos estados de madurez de las infrutescencias en condiciones in vitro, tres concentraciones de ácido giberélico (GA3) en condiciones ex vitro y dos in vitro y finalmente cuatro sustratos de germinación, turba, tierra, tierra-turba y medio MS. Las semillas provenientes del estado de madurez E1, presentaron un menor porcentaje de germinación (17,95 %) comparado con las semillas provenientes de las del estado E2 (86,84 %) (P < 0,05), lo que determinó el uso de este estado de madurez en los experimentos posteriores. Por otra parte, se determinó que las semillas germinan eficientemente en condiciones in vitro en medio semisólido MS, obteniendo un porcentaje de germinación del 88,2 %, muy superior al obtenido con sustratos convencionales (P < 0,05), evidenciando así que este método es muy eficiente para la multiplicación de palma de iraca y puede ser usado en la producción a gran escala de plántulas de este cultivo.
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