AIM: The aim of this study was to introduce a micromeritic procedure (a statistical approach for small objects) in indirect immunofl uorescence assay (IFA) to fi nd objective quantitative parameters of antinuclear antibody (ANA) patterns which could support a diagnosis of auto-immune diseases. MATERIALS AND METHODS: Sera of patients with systemic autoimmune diseases, McCoy-Plovdiv serum-free cell line, goat anti-human immunoglobulin-G FITC-conjugate, fl uorescent microscope, computer-assisted digital image processing, analysis using a micromeritic procedure, ANOVA. RESULTS: Three ANA fl uorescent patterns (homogeneous, rim and speckled) were analyzed by the micromeritic procedure. Parameters for the image brightness of the pixels (pixel grey value) were obtained and discussed as objective characteristics of fl uorescent patterns: maximum ANA-linkage volume and surface density were established for the objects with speckled localization pattern. CONCLUSION: The micromeritic method for getting objective quantitative values of ANA fl uorescent patterns in indirect immunofl uorescent assay might be a valuable tool aiding in immunological diagnosing if integrated in a laboratory software package. РЕЗЮМЕ ЦЕЛЬ: Работа ставит себе целью ввести микрометрическую процедуру (статистический анализ, применя-емый для небольших объектов) в индиректный флюоресцентный анализ в целях получения объективных количественных параметров при анализе локализации антинуклеарных антител в диагностике аутоим-мунных заболеваний. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: Применены: сыворотки пациентов с системными аутоим-мунными заболяваниями; безсывороточная клеточная линия McCoy-Plovdiv; маркированный флюорохро-мом FITC иммуноглобулин; флюоресцентный микроскоп; цифровизирование и обработка изображений; микрометрический анализ; ANOVA статистическая обработка данных. РЕЗУЛЬТАТЫ: Три вида локализации антиген-антитела (ANA) реакции -гомогенная, периферическая и петнистая -анализированы микроме-трическим методом. Считается, что яркость пикселов флюоресцентных изображений служит объектив-ной характеристикой вида локализации. Максимальный объем и поверхностная плотность связанных с субстратом ANA получены для петнистого типа локализации. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Mикрометрический метод количественной характеристики типа ANA локализации в индиректной иммунофлюоресценции может оказаться ценным дополнительным инструментом для анализа в иммунологических диагностических ла-бораториях с возможностью для включения в пакет программного обепечения (sofware) компьютерной программы для обработки изображений.Ключевые слова: антинуклеарные антитела, иммунофлюоресценция, цифровой анализ изображений, FITC, распределение размера пикселя lens -40x. The reaction between ANA and nuclear antigens of McCoy-Plovdiv cells was visualized as apple-green staining of nuclear structures under UV light. The intensity and patterns of fl uorescence were assessed and recorded.Selection of fl uorescent patterns for analysis. Three nuclear fl uorescent patterns, corresponding to different ANA localization in the nucleu...
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
customersupport@researchsolutions.com
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
This site is protected by reCAPTCHA and the Google Privacy Policy and Terms of Service apply.
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.