Cryptosporidiosis is a common protozoan disease observed in a wide range of vertebrate hosts, including ruminants. Cattle can be a potential reservoir of Cryptosporidium spp., leading to environmental contamination with oocysts of zoonotic species. The molecular characterization of Cryptosporidium spp. isolated from cattle from the state of São Paulo, Brazil, was accomplished using nested polymerase chain reaction for amplification of fragments of the 18S rRNA gene and the glycoprotein GP60 gene, following sequencing of amplified fragments. Positivity for Cryptosporidium was found in 10.7% (21/196) of the samples. Four species of Cryptosporidium were identified: C. andersoni, C. bovis, C. parvum subtype IIaA15G2R1, and C. ryanae. To the best of our knowledge, this is the first report of infection by C. ryanae and C. parvum IIaA15G2R1 in cattle from Brazil.
To evaluate the necessary time and to identify the differences among anthelmintics for the reduction of parasite eggs shed in feces, five groups of cattle were treated with moxidectin, ivermectin, levamisole phosphate, and albendazole sulphoxide. Levamisole promoted a reduction in egg count per gram (EPG-R) of 97.4% after 24 hours, moxidectin 98.3% after 36 hours, and albendazole sulphoxide 95.9% after 36 hours post-treatment. Cooperia spp. and Haemonchus spp. showed resistance to ivermectin. The results demonstrated that the diagnosis of parasite resistance in cattle can be based on a count of eggs per gram (EPG) carried out as soon as seven days after the treatment.Keywords: Anthelmintic, cattle, resistance, Cooperia, Haemonchus. ResumoNo intuito de avaliar o tempo necessário para redução dos valores de OPG visando identificar o início de atuação dos anti-helmínticos, cinco grupos de novilhos, naturalmente infectados por nematódeos gastrintestinais foram tratados com moxidectina, ivermectina, fosfato de levamisol e sulfóxido de albendazol. O levamisol promoveu redução no número de ovos de nematódeos eliminados nas fezes (R-OPG) de 97,4% 24 horas após a aplicação, a moxidectina de 98,3% após 36 horas, e o sulfóxido de albendazol de 95,9% após 36 horas. Foi registrada a presença de Cooperia spp. e Haemonchus spp. com resistência a ivermectina. A contagem de OPG realizada aos sete dias pós-tratamento apresentou resultados similares aos obtidos nas contagens realizadas 10 e 14 dias após a aplicação dos anti-helmínticos avaliados, demonstrando que o intervalo adequado entre o tratamento anti-helmíntico e o exame para verificar a redução do OPG pode ser de 7 dias.
O presente estudo teve como objetivo comparar as técnicas de imunofluorescência direta (IFD) e a microscopia de contraste de fase em solução de Sheather (MCF), para detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros. A determinação dos limiares detecção da IFD e da MCF foi realizada utilizando cinco alíquotas de uma amostra fecal de bezerro, comprovadamente negativa para Cryptosporidium spp., adicionadas com diferentes quantidades de oocistos de Cryptosporidium parvum. Ao exame das 5 alíquotas, a IFD e a MCF apresentaram, respectivamente, limiares de detecção de 3,3x104 (duas alíquotas positivas) e 3,3x105 oocistos (1 alíquota positiva) por grama de fezes. Foram também realizadas a comparação entre a positividade obtida e uma análise semiquantitativa do número de oocistos observados por campo de microscopia, em ambos os métodos, em 300 amostras fecais de bezerros. Entre as 300 amostras, 19,7% (59/300) foram positivas pela IFD, com diferença estatisticamente significante (P=0,0098) quando comparada com a positividade obtida pela MCF, que foi de 11,7% (35/300). As amostras positivas foram submetidas à reação em cadeia da polimerase para amplificação de fragmentos da subunidade 18S do rRNA, com posterior sequenciamento dos fragmentos amplificados, o que permitiu a identificação de Cryptosporidium andersoni em 11,9% (7/59) e de C.parvum em 88,1% (52/59) das amostras. Os resultados observados comprovam que a IFD foi mais eficiente que a MCF para detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros.
A criptosporidiose é uma doença entérica grave, com manifestação clínica variada e eventual mortalidade, especialmente em animais jovens. Este estudo objetivou realizar a detecção molecular e a subtipagem de Cryptosporidium spp. em cabritos, bezerros, cordeiros, leitões epotros que compartilhem o mesmo ambiente. Amostras fecais foram coletadas diretamente do reto de 192 cabritos, 184 bezerros, 44 cordeiros, 47 leitões e 26 potros com até 12 meses de idade, machos e fêmeas, de raças diferentes, provenientes dos estados de Goiás, Mato Grossodo Sul, Minas Gerais e São Paulo. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi realizada para a amplificação dos fragmentos do gene da subunidade 18S rRNA e do gene da glicoproteína GP60.Amplificação positiva para Cryptosporidium foi identificada em 16,7% (32/192) dos cabritos, 6,5% (12/184) dos bezerros e 2,1% (1/47) dos leitões. O sequenciamento dos produtos obtidos com o gene 18S rRNA identificou todas as amostras de cabritos como C. parvum. Entre osbezerros, as espécies identificadas foram C. parvum em 41,7% (12/05), C. andersoni em 16,7% (12/02), C. ryanae em 16,7% (12/02) e C. bovis em 25% (3/12). Para todas as amostras analisadas com o gene GP60, C. parvum subtipo IIaA15G2R1 foi encontrado em cabritos, bezerros e leitõesque compartilhavam o mesmo ambiente. Esta é a primeira descrição da identificação molecular e subtipagem de Cryptosporidium em cabritos e leitões no Brasil. Concluímos que espécies de Cryptosporidium envolvidas nas infecções entéricas de animais de fazenda no Brasil podem causar infecções zoonóticas em outros animais, incluindo os seres humanos.
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