Most biological fluids contain both neutral and acid α-glucosidase. Optimal conditions were therefore developed for the selective determination of the activity of neutral and acid ot-glucosidase, using 2-step, discontinuous assays. In the first Step of the assay of neutral α-glucosidase, glucose was liberated from maitose (citrate-phosphate buffer, pH 6.8, 20 mmol/1 maitose, 25 mmol/1 turanose). Under these incubation conditions, turanose inhibited the residual activity of acid α-glucosidase alnjost completely without influencing the activity of neutral α-glucosidase. In the first Step of the acid α-glucosidase'assay, glucose was liberated from maitose (citrate-phosphate buffer, pH 3.8, 50 mmol/1 maitose, 2 mol/1 potassium Chloride). Under these incubation conditions, potassium ions stimulate the activity of acid α-glucosidase and simultaneously inhibit almost completely the residual activity of neutral α-glucosidase. In the second step of the assay of neutral and acid α-glucosidase, the liberated glucose was measured by hexokinase/glucose-6-phosphate dehydrogenase. The effect of turanose and potassium ions on neutral and acid α-glucosidase from human urine was characterized. Selektive Bestimmung der Aktivit t von neutraler und saurer a-Glucosidase in diskontinuierlichen TestsZusammenfassung: Die meisten biologischen Fl ssigkeiten enthalten gleichzeitig Aktivit ten von neutraler und saurer a-Glucosidase. Es wurden optimale Bedingungen f r diskontinuierliche Tests in zwei Schritten zur selektiven Aktivit tsbestimmung von neutraler und saurer α-Glucosidase entwickelt. Im ersten Schritt der Bestimmung der neutralen α-Glucosidase wird Glucose aus Maltose freigesetzt (Citrat-Phosphat-Puffer, pH 6,8, 20 mmol/1 Maltose, 25 mmol/1 Turanose). Bei den gew hlten Inkubationsbedingungen hemmt Turanose die verbleibende Aktivit t von saurer α-Glucosidase fast vollst ndig, ohne die Aktivit t der neutralen aGlucosidase zu beeinflussen. Im ersten Schritt der Bestimmung der sauren α-Glucosidase wird Glucose aus Maltose freigesetzt (Citrat-PhosphatrPuffer, pH 3,8, 50 mmol/1 Maltose, 2 mol/1 Kaliumchlorid). Bei den gew hlten Inkubationsbedingungen stimulieren Kaliumionen die Aktivit t der sauren α-Glucosidase bei. gleichzeitiger fast vollst ndiger Hemmung der verbleibenden Aktivit t von neutraler α-Glucosidase. Im zweiten Schritt der Bestimmung der neutralen und sauren α-Glucosidase wird die freigesetzte Glucose mit der Hexokinasemethode gemessen. Der Effekt von Turanose und Kaliumionen auf die neutrale und saure aGlucosidase aus menschlichem Urin wurde charakterisiert.

The catalytic activities of neutral and acid a-glucosidase were selectively determined in human urine. Urinary excretion of neutral and acid α-glucosidase in reference subjects was found to be in the r nge 1.61 to 20.36 μίςαί/πιοί creatinine and 7.47 to 33.60 μkat/mol creatinine, respectively. Urinary excretion of both enzymes was not related to sex, age or diuresis. A continuous assay was introduced to improve the determination of neutral a-glucosidase. Bestimmung der Ausscheidung von neutraler α-Glucosidase mit einem kontinuierlichen optischen Test und von saurer α-Glucosidase im Urin von ReferenzpersonenZusammenfassung: Die Aktivit t von neutraler und saurer α-Glucosidase wurde selektiv im menschlichen Urin bestimmt. Im Urin von Referenzpersonen wurde eine Ausscheidung von neutraler α-Glucosidase zwischen 1,61 und 20,36 μkat/mol Kreatinin und von saurer α-Gl cosidase zwischen 7.47 und 33,60 μkat/mol Kreatinin gemessen. Die Ausscheidung beider Enzyme war weder geschlechts-, alters-noch diureseabh ngig. Zur Optimierung der Bestimmung von neutraler α-Glucosidase wird ein kontinuierlicher optischer Test eingef hrt.