No abstract

No abstract

No abstract

The acid-resistant 14-kDa inhibitor B I-14, released from bovine inter-a-trypsin inhibitor, consists of two tandem Kunitz-type domains, and is of a double-headed nature. The Arg-Thr bond connecting both domains was cleaved and the two inhibitory domains were separated. The N-terminal domain is an inhibitor of bovine chymotrypsin and elastases from porcine pancreas and human polymorphonuclear granulocytes, whereas the C-terminal domain interacts with trypsin, plasmin, and chymotrypsin. in the intact inhibitor BI-14 both domains interact independently with the proteinases. Proteinaseinhibitoren vom Kunitz-Typ als Abkömmlinge des Inter-a-trypsininhibitors, VIII: Charakterisienmg des Rinderinhibitors als doppelköpflger InhibitorZusammenfassung: Der aus Rinder-Inter-a-trypsininhibitor freigesetzte säurestabile 14-kDa-Inhibitor BI-14 besteht aus 2 Tandem-Kunitz-Typ-Domänen, d.h. es handelt sich dabei um einen doppelköpfigen Hemmstoff. Die Arg-Thr-Bindung zwischen den Domänen wurde gespalten und beide Domänen wurden in inhibitorisch aktiver Form isoliert. Die N-terminale Domäne hemmt Rinder-Chymotrypsin und die Elastasen aus Schweinepankreas und menschlichen polymorphkernigen Granulozyten, die C-terminale Domäne reagiert mit Trypsin, Plasmin und Chymotrypsin. Im intakten Inhibitor BI-14 sind beide Domänen unabhängig voneinander wirksam. Enzymes: Trypsin (EC 3.4.21.4); chymotrypsin (EC 3.4.21.1); pancreatic elastase (EC 3.4.21.36); polymorphomiclear granulocytic elastase (EC 3.4.21.37); plasmin (EC 3.4.21.7); tissue kallikrein (EC 3.4.21.35).Abbreviations: B-1TI = Bovine inter-a-trypsin inhibitor; BI-14, HI-14 = Bovine and human 14-kDa inhibitor, respectively, released from B-ITI by tryptic proteolysis; BI-8-E = Bovine 8-kDa inhibitor released from BI-14 by tryptic proteolysis; antielastase active; BI-8-T = Bovine 8-kDa inhibitor released from BI-14 by tryptic proteolysis; antitryptic active;. BI-14* = Bovine 14-kDa inhibitor obtained from BI-14 by tryptic proteolysis; with decreased antitryptic activity; BPTI = Bovine pancreatic trypsin inhibitor (Kunitz-type); PMN = Polymorphonuclear. Synthetic substrates are abbreviated according to the IUPAC-IUB Rules for abbreviation of amino acids; substituents: Bz = benzoyl; Nan = 4-nitroanilide; OEt = ethyl ester; Sue = 3-carboxypropionyl.

The N-terminal amino-acid sequence of human ITI has been found to be identical with that of the acid-stable human 30-kDa inhibitors (HI-30) from urine, serum, and those released from inter-a-trypsin inhibitor by trypsin or chymotrypsin. Serum HI-30 and HI-30 released by trypsin differ from the urinary inhibitor by an additional C-terminal arginine residue.Compared to these two inhibitors the inhibitor released by chymotryptic proteolysis is elongated C-terminally by an additional phenylalanine residue. These results strongly favour HI-30 as the N-terminus of the inter-a-trypsin inhibitor and its release from this inhibitor in vivo by cleavage of the Arg 123 -Phe 124 peptide bond by trypsin-like proteinases. Der menschliche Inter-a-trypsininhibitor: Lokalisation der Kunitz-Typ-Domänen im N-terminalen Teil des Moleküls und deren Freisetzung durch eine trypsinähnliche ProteinaseZusammenfassung: Die N-terminale Aminosäure-Harninhibitor durch einen um einen Argininrest sequenz des menschlichen Inter-o:-trypsininhibitors wurde bestimmt. Sie ist identisch mit der Aminosäuresequenz der säurestabilen menschlichen 30-kDa-Inhibitoren (HI-30) aus Harn und Serum sowie der aus Inter-a-trypsinhibitor durch Trypsin und Chymotrypsin freigesetzten Inhibitoren. Der durch Trypsin freigesetzte und der aus Serum isolierte Inhibitor unterscheiden sich vom verlängerten C-Terminus. Der chymotryptisch freigesetzte Inhibitor ist um einen weiteren Phenylalaninrest verlängert. Diese Ergebnisse sprechen dafür, daß HI-30 den N-Terminüs des nativen Inter-a-trypsinhibitors bildet und daß in vivo eine Spaltung der Arg 123 -Phe 124 -Peptidbindung durch trypsinähnliche Proteinasen erfolgt.