RésuméNous nous sommes intéressés à la quantification des caséines bovines par chromatographie liquide rapide d'échange d'ions sur colonne Mono Q (Pharmacia). La sépara-tion des caséines, à partir de la caséine entière, est réalisée à l'aide d'un tampon Tris 5 10-3 M ; Urée 4,5 M, pH 8,0, en présence de dithiothréitol (6.4 10-5 M), par ungradient linéaire en chlorure de sodium. La durée du gradient et le débit peuvent être choisis de façon à obtenir une analyse rapide des 4 caséines (USIo «S2, 13, K) ou la caractérisation d'un maximum de formes de caséine. Cependant, la séparation des caséines «SI et «S2 est incomplète.Dans ces conditions, la méthode s'est révélée être linéaire, répétable et reproductible. De plus, nous avons séparé, à partir du lait écrémé, les caséines d'avec les protéines du lactosérum. Cela permet une quantification directe des caséines dans le lait et évite une perte de caséine entière lors de sa préparation par précipitation isoélectri-que. Les études réalisées sur les variants génétiques des caséines, ont montré que cette méthode permet de séparer certains d'entre eux. Mots clés:Caséines -Lait -Vache -Chromatographie -Dosage. Summary Quantitative analysis of caseins in cow milk by FPLCThe quantification of bovine caseins by Fast Protein Liquid Chromatography on a Pharmacia Mono Q column has been investigated. The separation of caseins from whole casein, was achieved by using a 5.10-3 M Tris; 4.5 M Ure a buffer pH 8.0 in presence of dithiothreitol (6.4 10-5 M), and a linear gradient of sodium chloride. The gradient lenght and flow rate may be chosen so as to have a rapid analysis of the 4 caseins (<

No abstract

Hydrolysis of βA2‐casein by bovine chymosin and pepsin A was performed in order to compare the hydrolysis of the two enzymes on this protein. Different conditions have been tested: pH 5.5 for 116 h and pH 3.5 for 7h[E/S = 1/100 (w/w)] for chymosin. pH 3.0 for 24 h [E/S = 1/1000 (w/w)] for pepsin A. Under these conditions 17 peptides were obtained after the action of chymosin and 23 after the action of pepsin A. They corresponded respectively to the cleavage of 14 and 15 peptide bonds for chymosin and pepsin A. However, six of the peptide bonds were only hydrolyzed by chymosin and seven other bonds only by pepsin A. Our results showed a preferential splitting at the Leu‐X, Ser‐X, and Trp‐X bonds for chymosin and Leu‐X, Met‐X, and Thr‐X, for pepsin A. Some of the identified peptides contained sequences with possible physiological roles.