Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar o conhecimento e o comportamento preventivo sobre a toxoplasmose e relacionar com as condições socioeconômicas, do pré-natal e ambientais entre as gestantes da Estratégia Saúde da Família (ESF), do município de Imperatriz, Maranhão, Brasil. Neste estudo transversal foi aplicado um questionário estruturado e pré-testado, com amostra de 239 gestantes. Somente 23,4% das gestantes apresentaram bom conhecimento sobre a doença, com ênfase no domínio prevenção; 58,9% adotaram adequadamente os comportamentos preventivos. Os resultados obtidos chamam a atenção pela associação significativa a vários fatores de risco para a toxoplasmose, como: consumo de água sem tratamento (OR = 2,1245; IC95% = 1,20-3,73; p = 0,0128), contato com gatos (OR = 7,6875; IC95% = 4,22-13,97; p < 0,0001), limpeza das fezes do gato (OR = 6,8738; IC95% = 3,02-15,60; p < 0,0001), consumo de carne crua (OR = 5,7405; IC95% = 3,21-10,24; p < 0,0001) e mexer com areia (OR = 10,7376; IC95% = 4,64-24,85; p < 0,0001), gerando a necessidade de uma educação continuada sobre a toxoplasmose para as gestantes atendidas na ESF de Imperatriz, e o estabelecimento de medidas preventivas mais integrais, com políticas públicas de saúde e educação que levem em consideração questões econômicas, sociais, ambientais e culturais.