The sorting of apical proteins comprises an initial recognition step in the trans Golgi network and a final partitioning of the apical pool of proteins into at least two different types of vesicular carriers. One criteria of these carriers is the association or non-association of the protein content with lipid rafts. We have previously characterized a population containing the raft-associated sucrase-isomaltase-carrying vesicles (SAVs) and another one, the non-raft-associated lactase-phlorizin hydrolase-carrrying vesicles (LAVs) that are targeted separately to the apical membrane. Here, we demonstrate biochemically and by employing confocal laser microscopy that the annexin II-S100A10 complex is a component of SAVs and is absent from LAVs. The unequivocal role of annexin II in the apical targeting of SI is clearly demonstrated when down-regulation of this protein by annexin II-specific small interfering RNA drastically decreases the apical delivery of SI in the epithelial cell line Madin-Darby canine kidney. The annexin II-S100A10 complex plays therefore a crucial role in routing SAVs to the apical membrane of epithelial cells.

For the determination of cellular total glutathione, a new method is presented based on a fluorometric procedure. The relation between reduced glutathione, mixed glutathione disulfides and disulfide glutathione will be designated the glutathione status.

Zusammenfassung In einer umfassenden Studie an der Ratte wurden in dem Modell von Taunton u.a. (1974) nach intraportaler Injektion bzw. Infusion einiger in der landwirtschaftlichen Praxis verwendeter ”Wachstumsförderer„ (Aureomycin, Carbadox, Flavomycin und CuSO4) in der Leber folgende Parameter erfaßt: Das Glutathionsystem, einige membranständige Flavinenzyme (NADPH‐Cytochromreduktase, Succinatdehydrogenase und Dihydroliponsäuredehydrogenase), einige Cytosol‐Regulationsenzyme (Glucose‐6‐phosphatdehydrogenase, Phosphofruktokinase, Pyruvatkinase, Fruktose‐1,6‐bisphosphatase sowie die Acetyl‐CoA‐Carboxylase (Fettsäurensynthese)) und die Proteinsynthese (getrennt in die Aminosäurenaktivierung und den Einbau in Leberproteine). Es konnte statistisch gesichert werden, daß innerhalb von 2–10 min nach Einwirkung der Wachstumsförderer das Glutathionsystem um durchschnittlich 15,3% reduziert wird, die Flavinenzyme um 13,5% inhibiert und die Cytosolenzyme parallel um 14,4% aktiviert werden, die Acetyl‐CoA‐Carboxylase – mit Ausnahme des CuSO4 – um 19,6% mit einer zeitlichen Verzögerung (20 min). Die Fruktose‐1,6‐bisphosphatase bleibt unbeeinflußt. Eine Stimulierung der Aminosäurenaktivierung um durchschnittlich 64,6% sowie des Einbaus der aktivierten Aminosäuren in die Leberproteine um 22,8% konnte innerhalb von 30 min nachgewiesen werden. Prinzipiell und im zeitlichen Ablauf entsprechen diese Ergebnisse genau den nach Insulininjektion bzw. ‐infusion beobachteten Effekten. Demnach kann es als sicher gelten, daß ”Wachstumsförderer„ dieselbe Kaskade (Flavinenzym → Glutationsystem → Enzymaktivitäten) in den zellulären Syntheseräumen induzieren können wie ein anaboles Hormon, wenn sie die Zelle erreichen. Sie wirken gewebeunspezifisch, während die Hormone durch gewebespezifische Rezeptoren in die Zellen eingeschleust werden, wodurch über den einfachen anabolen Effekt hinaus spezifische Funktionen – wie z. B. die Blutzuckerregulation – ermöglicht werden.

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